[发明专利]马铃薯枯萎病拮抗菌NZ-4及其应用

说明书

本发明提供一株马铃薯枯萎病拮抗菌NZ‑4，其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)，保藏号CGMCC NO.13606。本发明还提供所述拮抗菌NZ‑4在防治作物土传病害中的应用。盆栽试验表明，拮抗菌NZ‑4对马铃薯枯萎病有显著的防治作用，防治效果为62.14％；另外，菌株NZ‑4还对马铃薯炭疽病和疮痂病、小麦根腐病等病原菌有很强的拮抗作用；且施用拮抗菌NZ‑4发酵液能显著促进马铃薯植株的生长。拮抗菌NZ‑4及其微生物菌剂对我国农田土传病害和连作障碍防治，粮食持续增产和保护农田生态环境具有重要意义。

技术领域

本发明涉及微生物学和植物病害生防技术领域，具体地说，涉及马铃薯枯萎病拮抗菌NZ-4及其应用。

背景技术

马铃薯枯萎病是由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的一种马铃薯土传病害，分布广泛，在我国各种植区均有发生。马铃薯枯萎病可以对植株的整个生育期造成危害，病原菌主要从植株的根部伤口和根毛生长点侵入，进而破坏其根、茎以及叶的维管束，导致部分或整个维管束变褐，使植株吸收和运输水分功能丧失，最终造成植株枯萎死亡。近几年来，随着马铃薯主粮化战略的实施，马铃薯种植面积逐年扩大，由此带来的连作重茬导致马铃薯枯萎病日益加重，严重制约了马铃薯产业的发展。因此，深入研究有效防治马铃薯枯萎病的方法己成为当前生产上亟待解决的重要问题。

利用微生物防治植物真菌性病害，对环境和人类的安全性、减缓病原菌抗药性等具有重要意义，已经成为当前植物病害防治的研究热点。1973年澳大利亚植物病理学家Kerr利用放线土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter K84)成功防治了植物根癌病，此后人们对植物病害的生物防治研究陆续深入。

芽孢杆菌属是一类好氧或兼型厌氧、产生抗逆性内生孢子的杆状细菌，由于能够产生脂肽类和蛋白类等抗真菌物质，具有广谱抗真菌活性和良好的稳定性，已成为重要的农业生防菌。目前，有关解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的研究较多。枯草芽孢杆菌作为生防细菌已经被商业化生产，它能够控制黄瓜和番茄上的瓜果腐霉和烟草疫霉，同时还具有促进植株生长的作用。宋松等分离到一株解淀粉芽孢杆菌SQR11对烟草青枯病具有稳定的拮抗作用；郭荣君等利用营养竞争平板筛选法获得了可在大豆麦麸(SWB)培养基上快速生长并拮抗大豆根腐病菌Fusariumoxysporum和F.solani的枯草芽孢杆菌B006和B010；林峰从花生荚果际中筛选到37株对致癌物质黄曲霉毒素具有抑制作用的生防芽孢杆菌，其中，枯草芽孢杆菌为优势种，共27株，其次为5株蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)，还有2株解淀粉芽孢杆菌、2株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)和1株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。

本发明从16个马铃薯枯萎病发生地块的健康植株根际分离筛选出1株对马铃薯枯萎病病原菌有极强抗性的芽孢杆菌菌株，并对其对马铃薯枯萎病的防治效果以及对马铃薯植株的促生作用进行了研究，旨在为马铃薯枯萎病的生物防治以及生防菌剂的开发提供科学依据。

发明内容

本发明的目的是提供一株新的马铃薯枯萎病拮抗菌NZ-4。

本发明的另一目的是提供菌株NZ-4在防治作物土传病害中的应用。

为了实现本发明目的，本发明从河北、内蒙古以及贵州16个马铃薯试验田采集根际土样，分离得到288株芽孢杆菌菌株。经筛选得到1株对尖孢镰刀菌马铃薯专化型具有较强拮抗作用的菌株NZ-4。根据其菌落和菌体形态特征及gyrB基因序列分析，鉴定其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。马铃薯枯萎病拮抗菌NZ-4现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号保藏号CGMCC NO.13606，保藏日期2017年1月13日。