[发明专利]miRNA‑146a及其抑制剂在提高CIK细胞杀伤力方面的应用

说明书

技术领域

本发明属于免疫领域，涉及CIK细胞的培养，具体涉及miRNA-146a及其抑制剂在提高CIK细胞杀伤力方面的应用。

背景技术

随着肿瘤临床治疗的发展，肿瘤免疫治疗方法受到广泛关注。细胞免疫治疗为肿瘤免疫治疗的一种，目的是通过改善患者的免疫系统，达到间接治疗肿瘤的目的。常用于细胞免疫治疗的细胞包括细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞、树突状细胞(DC)、自然杀伤(NK)细胞等。其中，CIK细胞是一种经体外诱导培养形成的具有肿瘤细胞杀伤活性的NK样T细胞，其克服了淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、肿瘤浸润细胞(TIL)等细胞增殖能力差、对肿瘤细胞毒性低的缺点，能满足临床治疗的要求[Cytokine-induced NK-like T cells:from bench to bedside.JBiomed Biotechnol,2010]。

CIK细胞培养简单，将单个核细胞在体外培养，有序地添加IFN-γ、抗CD3单克隆抗体、IL-1α、IL-2进行诱导，2～3周以后即可收获大量具有强细胞毒性的效应细胞。收获的CIK细胞是异质细胞群，大约95％以上表达CD3+，还含有少量NK细胞。CIK细胞主要的效应群体是一群终末分化的T细胞，细胞表面表达CD3+CD56+。在单个核细胞中，原有CD3+CD56+表达很低；经过体外诱导以后，表达CD3+CD56+的细胞迅速扩增，这些细胞来源于单个核细胞中的CD3+CD56-细胞，是由CD3+CD56-细胞中的CD4-CD8+细胞诱导而来[Characterization of the recognition and functional heterogeneity exhibited by cytokineinduced killer cell subsets against acute myeloid leukaemia target cell.Immunology,2009]。

CIK细胞的体外增殖能力远优于LAK细胞，在短期培养后即可达到临床所需要的抗肿瘤效应细胞的数量。CIK细胞有广谱的、较强的杀伤肿瘤细胞的作用，对肿瘤细胞的毒性是非MHC限制的，对一些具有耐药性的肿瘤细胞系的毒性也不受影响[CIK cells from patients with HCC possess strong cytotoxicity to multidrug-resistant cell line Bel-7402/R.World J Gastroenterol,2005]。CIK细胞对同种自体或者同种异体肿瘤均具有相似的细胞毒性，并且对一般的肿瘤干细胞样细胞也具有细胞毒性[Cytokineinduced killer cells eradicate bone and soft-tissue sarcomas.Cancer Res,2014]。为了提高CIK的毒性和治疗效果，许多研究致力于CIK细胞。

发明内容

本发明首先提供miRNA-146a作为药物靶标在提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力中的应用；其次提供miRNA-146a抑制剂或含有该抑制剂的试剂或试剂盒在提高CIK细胞对肿瘤细胞杀伤力中的应用，并提供Cyclo(Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala)作为有效miRNA-146a抑制剂。

本发明通过如下技术方案得以实现：

miRNA-146a作为药物靶标在提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力中的应用。

进一步地，所述肿瘤细胞为白血病细胞。

miRNA-146a抑制剂在提高CIK细胞对肿瘤细胞的杀伤力中的应用。

进一步地，所述肿瘤细胞为白血病细胞。

进一步地，miRNA-146a抑制剂为环状六肽，结构为Cyclo(-Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala-)。

含miRNA-146a抑制剂的试剂或试剂盒在提高CIK细胞对肿瘤细胞杀伤力中的应用。

进一步地，所述肿瘤细胞为白血病细胞。

进一步地，miRNA-146a抑制剂为环状六肽，结构为Cyclo(-Gly-Thr-Phe-Leu-Tyr-Ala-)。

本发明优点：