[发明专利]用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法有效
| 申请号： | 201611175036.9 | 申请日： | 2016-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN106596648B | 公开（公告）日： | 2019-02-01 |
| 发明（设计）人： | 叶伟伟;孙毅 | 申请（专利权）人： | 宁海县浙工大海洋研究院 |
| 主分类号： | G01N27/02 | 分类号： | G01N27/02 |
| 代理公司： | 杭州斯可睿专利事务所有限公司 33241 | 代理人： | 王利强 |
| 地址： | 316500 浙江省宁波市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 环境 抗生素 检测 分析 细菌 生物 传感器 制备 方法 | ||
1.一种用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
(1)氧化铝纳米多孔膜的表面功能化
氧化铝纳米多孔膜用3-(2,3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷进行硅烷化处理后，利用环氧树脂胶封于聚二甲基硅氧烷PDMS容器中；加入沙门氏菌抗体溶液，0～4℃下静置3～6小时后，使得抗体固定在多孔膜上；
往PDMS容器的上下腔以恒定的速率缓慢通入和抽出PBS缓冲液，用于清洗未被固定的沙门氏菌抗体1～3次；将准备好的氧化铝纳米多孔膜器件放在4℃条件下备用；
(2)捕获细菌：将培养好的沙门氏菌分散在PBS缓冲液中，配成不同浓度的沙门氏菌溶液；取上述准备好的沙门氏菌溶液，加入到步骤(1)中得到的氧化铝纳米多孔膜上，静置6～10小时后，往PDMS容器的上下腔以恒定的速率缓慢通入和抽出PBS缓冲液，用于清洗未被固定的沙门氏菌1～3次，制备得到基于氧化铝纳米多孔膜的细菌生物传感器。
2.如权利要求1所述的用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法，其特征在于：所述方法还包括以下步骤：
(3)抗生素检测分析：往步骤(2)得到的细菌生物传感器加入待测试抗生素样品，抗生素作用一段时间后，往PDMS容器的上下腔以恒定的速率缓慢通入和抽出PBS缓冲液，用于冲去失活的细菌和多余的抗生素1～3次；根据氧化铝纳米多孔膜两端阻抗的变化检测分析待测试样品中的抗生素。
3.如权利要求1或2所述的用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，沙门氏菌抗体溶液浓度为0.5μg/mL，溶剂为pH 7.4、0.1M的PBS缓冲液。
4.如权利要求1或2所述的用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，沙门氏菌溶液浓度为0.001～10^5CFU/μL，溶剂为pH 7.4、0.1M的PBS缓冲液。
5.如权利要求2所述的用于环境中抗生素检测分析的细菌生物传感器的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，抗生素作用时间为5分钟～5小时。
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