[发明专利]一种异常黏液质型阳痿病证哺乳动物血清和阴茎平滑肌组织差异蛋白体系及筛选方法与应用

说明书

本发明提供了维医异常黏液质型阳痿病证的哺乳动物血清差异蛋白和阴茎平滑肌组织差异蛋白体系，以及上述差异蛋白体系的筛选方法，包括1)正常对照组、造模证侯组与病证组；2)采集全血，分离血清与阴茎平滑肌组织；3)提取蛋白质；4)标记后纯化；5)质谱检测后得到指纹图谱，筛选后进行蛋白质组学分析，获得所述证候组、病证组和正常对照组血清蛋白质和阴茎平滑肌组织蛋白质；6)统计、比较、筛选得到维医异常黏液质型阳痿病证血清差异蛋白质和阴茎平滑肌组织差异蛋白质，为进一步开展异常黏液质型阳痿(勃起功能障碍)病证机制研究、药物筛选、转化与防治研究奠定了基础，提供了依据。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种维医异常黏液质型阳痿病证的哺乳动物血清和阴茎平滑肌组织差异蛋白及其筛选方法与应用。

背景技术

维吾尔医(维医)学是祖国传统医学中重要组成部分，维医学体液论认为，人体由胆液质、血液质、黏液质和黑胆质4种体液质组成，上述4种体液质的动态平衡是机体健康的生理基础，而某一种体液质的量或/和质的变化，引起体液质平衡失调，产生一种异常体液质证(证候)，与多种疾病的发生存在因果关系。体液病理学(体液论)是维医理论根基，其认为4种体液中，黏液质体液属性湿寒，常易因生活、饮食与环境因素、工作压力、缺乏运动等原因导致体内体液平衡遭到破坏，黏液质体液发生改变，产生异常黏液质，致代谢水平降低，产物蓄积体内，进而导致病理性改变，引发相关疾病。

临床研究证实，异常黏液质证(Abnormal Phlegm)在阳痿(阴茎勃起功能障碍)、早泄、少弱精症、卵巢早衰、不孕不育等生殖疾病、肥胖症、高脂血症等代谢性疾病和心血管疾病发生过程中，处于主导地位，可能也是肿瘤、糖尿病、高血压等复杂性疾病发生早期的主要证型。勃起功能障碍(Erectile Dysfunction，ED)，又称阳痿，是指男子阴茎不能勃起及不能维持勃起而完成满意的性生活，属维医优势病种。阴茎勃起是由多种生物活性因子(包括神经递质，激素，酶，离子通道等)综合调节的神经-血管性生物活动。在维医药临床与基础研究方向，因实验动物学起步较晚，无相关病证结合动物模型，导致异常黏液质型阳痿病证及其对证方药作用机理研究一直滞后，并严重制约了维医男科在此领域的研究与发展，更无关于异常黏液质型阳痿病证的相关标志蛋白及其蛋白标志物体系的研究报道。

为了从现代生殖生物学角度进一步认识维医异常黏液质型阳痿，我们基于维医体液论和造模理念，成功建立了异常黏液质证候动物模型，并采用APO阴茎勃起实验与交配实验结合的方法，从中筛选出ED模型，对其生物学表征、性功能与交配行为、性腺轴与NO-CGMP信号转导通路等生殖生物学方面的改变进行了研究，但异常黏液质型阳痿病证并非是单一生殖器官即阴茎平滑肌组织的的疾病，而是全身性疾病，因此需要我们用整体观念，从全身的视野，来分析、研究和探索该病证的发生发展规律与可能的治疗方法。维医辨证分型的起点和核心是维医“体液论”，其出发点是人体内在体液动态变化的外在表现，而维医药学所推崇的辨证施治也是依据个体的整体水平上发生的体液表型差异，这与系统生物学整体研究思路不谋而合。

血清融入了机体多器官、组织和细胞的蛋白质动态信息，也是与阴茎勃起功能密切相关的分泌蛋白必经之路，可以反映机体的病理生理改变相关的总体调控网络的时空性，而药物对任何靶器官、组织或细胞的作用最终也反映在血清蛋白质组变化之中。阴茎是阴茎勃起的效应器官，海绵体平滑肌则为效应组织，其任何一种病理胜利改变也与该组织蛋白质水平动态变化密不可分，其中蕴藏着阳痿发生相关的潜在蛋白标记，也是该疾病药物治疗的重要靶点之一。

故，本研究基于异常黏液质证候与病证结合动物模型基础上，开展了血清和阴茎平滑肌组织的蛋白质组学研究，建立了异常黏液质型阳痿病证相关血清和阴茎平滑肌组织蛋白体系，为进一步开展异常黏液质型阳痿病证的机制研究、药物筛选、转化与防治研究奠定了基础。

发明内容

有鉴于此，本发明的第一目的在于提供维医异常黏液质型阳痿病证的哺乳动物血清差异蛋白体系，包括以下蛋白：