[发明专利]软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法

说明书

技术领域

本发明属于铁皮石斛培育技术领域，具体涉及软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法。

背景技术

铁皮石斛是我国传统名贵珍稀中药材，被列为国家二级保护植物。近年来在药用及保健方面的突出作用越来越被广大消费者接受认可，资源缺乏的瓶颈十分突出。品种杂，品质差是现今铁皮石斛种源存在的问题。而品种变异和遗传基因不稳定，容易杂交变种，自花授粉坐果低抗逆性差是品种选育的难题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，该方法能针对性解决铁皮石斛品种杂、品质差、抗逆性差等问题，对铁皮石斛产业的发展提供了优质种源保障。

本发明采用的技术方案是：所述软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，包括以下步骤：

(1)、选择软脚红杆铁皮石斛品种性状显著、遗传基因相对稳定，且经植物基因测序确认的植株作为母本和父本种源；

(2)、将作为母本和父本种源的软脚红杆铁皮石斛幼苗置于大棚，隔离栽培生长，大棚内空气相对湿度保持在80％～90％，温度20～25℃，日照时数：10h/天，2.2×10⁴～3×10⁴lux光强，且通风条件良好；

(3)、待软脚红杆铁皮石斛生长开花至花期绽放，选择花蕾绽放24h内的晴天上午10：00～13：00时段进行人工异花授粉，授粉成功的花朵会在7天内子房逐渐开始膨大坐果形成果荚；

(4)、将培育成熟的果荚通过植物组织培养扩大繁殖；所述植物组织培养分为两个阶段：种子培养和原球茎悬浮培养；

所述种子培养的具体操作为：(a)对人工授粉的铁皮石斛果荚进行杀菌消毒；(b)在无菌条件下，把种子接种到萌芽培养基上，所述培养基为N6培养基，蔗糖浓度1.6～2.2％，NAA浓度0.2～0.5mg/L；培养温度25～28℃，光照度1600～2000lx，光照10～12h/天；(c)生根瓶苗：种子萌发后，转瓶3～4次，当幼苗长出4～5片真叶，并具有3～4条1～2cm长的根时，可将试管苗进行练苗后移栽；生根瓶苗的培养基为MS+NAA 0.2mg/L+土豆汁10％；

所述圆球茎悬浮培养的具体操作为：悬浮培养的培养基为1/4MS+维生素C40mg/L，pH5.6，摇床转速为50r/min，15天继代一次，黑暗培养，得到分散性好、整齐均一的原球茎。

其中，上述软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法中，所述步骤(4)种子培养的具体操作(a)杀菌消毒的具体操作为：用75％的酒精对铁皮石斛果实表面消毒，30s后再用0.1％升汞消毒8min，无菌水冲洗4～5次。

本发明的有益效果是：该方法能够成功选育出成活率高、抗逆性强、高产、多糖含量高、胶质好基因遗传稳定的软脚红杆铁皮石斛品种，该品种成活率达99％，较其它铁皮石斛高5个百分点；极少病害，在铁皮石斛普遍较易发生的根腐病及黄叶病方面有明显抗性。在自然气温-3℃的低温时不冻死，40℃高温条件下仍能正常生长，耐温性方面具有明显优势；年亩产高达700公斤，多糖含量达48％，较其它品种铁皮石斛的产量和多糖含量分别高37％和50％。

具体实施方式

本发明提供了软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，该方法通过精选软脚红杆铁皮石斛品种性状特征显著的父本和母本植株进行防护培育直至开花，然后进行同种异株人工授粉；铁皮石斛人工授粉后结出的优良成熟果夹，采摘后对其进行组培无菌繁育，定向系统培养软脚红杆铁皮石斛种苗植株，在系代培养纯化品种。

所述软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，包括以下步骤：

(1)、选择软脚红杆铁皮石斛品种性状显著、遗传基因相对稳定，且经植物基因测序确认的植株作为母本和父本种源；

(2)、将作为母本和父本种源的软脚红杆铁皮石斛幼苗置于大棚，隔离栽培生长，大棚内空气相对湿度保持在80％～90％，温度20～25℃，日照时数：10h/天，2.2×10⁴～3×10⁴lux光强，且通风条件良好；

(3)、待软脚红杆铁皮石斛生长开花至花期绽放，选择花蕾绽放24h内的晴天上午10：00～13：00时段进行人工异花授粉，授粉成功的花朵会在7天内子房逐渐开始膨大坐果形成果荚；

(4)、将培育成熟的果荚通过植物组织培养扩大繁殖；所述植物组织培养分为两个阶段：种子培养和原球茎悬浮培养；