[发明专利]可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218、基因片段及重组蛋白

说明书

技术领域

本发明属于生物领域，尤其是一种对嘌呤核苷分解速率快、分解率高的可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218、基因片段及重组蛋白。

背景技术

血尿酸不仅仅是作为判定痛风病的指标，同时也是血压、血糖和血脂严重病患的一个重要判定指标，血尿酸超标与脂代谢紊乱、糖尿病、高血压、肥胖等多种代谢性疾病密切相关。现有高尿酸血症除以药物治疗之外，一般都要辅以严格的饮食控制，即尽可能减少外源性嘌呤类物质摄入。然而，由于各种食物中嘌呤类物质含量并没有准确的定论，特别是改善食物风味的鸡精、蚝油、鱼露等鲜味剂，其主要成份5’-呈味核苷酸二钠（包括5’-鸟苷酸二钠和5’-肌苷酸二钠）均为嘌呤类物质，因此严格的饮食控制是极其困难的。

肠道乳酸菌是机体胃肠道内的有益菌群，虽然已经证实其具有对嘌呤、嘌呤代谢中间产物肌苷、鸟苷以及尿酸的吸收功能，但现有菌株对嘌呤核苷的分解速率及分解率均较低，不能够满足降低血尿酸的临床要求。

发明内容

本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种对嘌呤核苷分解速率快、分解率高的可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218、基因片段及重组蛋白。

本发明的技术解决方案是：

一种可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218（Lactobacillus brevis），已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No. 12797。

可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218的 DNA序列如SEQ ID NO：1 所示。

一种上述可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218的基因片断，其 DNA序列如SEQ ID NO：2 所示。

一种上述可降低血尿酸的短乳杆菌DM9218的基因片断的重组蛋白，是以短乳杆菌DM9218的DNA为模板进行PCR反应，将所得PCR产物利用基因克隆方法所得到的重组蛋白，所述PCR反应上游引物及下游引物的DNA序列分别如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4所示。

本发明的短乳杆菌DM9218（Lactobacillus brevis）可快速分解肌苷、鸟苷等嘌呤核苷，其分解速率及分解率均高于现有技术，属于国家允许应用于保健食品范畴内的益生菌，可应用于制备降低高尿酸药物，安全、无毒副作用。

附图说明

图1是本发明实施例基因片段与载体连接双酶切后的电泳图。

图2是本发明实施例经诱导表达后菌液的SDS-PAGE电泳图。

图3是本发明实施例表达的重组蛋白SDS-PAGE电泳图。

图4是本发明实施例纯化后的目标蛋白SDS-PAGE电泳图。

图5是本发明实施例转入空载体的大肠杆菌BL21菌体与肌苷、鸟苷反应液的色谱图。

图6是本发明实施例未诱导的重组菌株与肌苷、鸟苷反应液的色谱图。

图7是本发明实施例纯化后的目标蛋白与肌苷、鸟苷反应液的色谱图。

图8是本发明实施例纯化后的目标蛋白与其它物质对肌苷与鸟苷的分解率对比图。

短乳杆菌DM9218保藏日期：2016年7月20日；

分类命名：短乳杆菌（Lactobacillus brevis）；

保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC）；

保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

保藏号：CGMCC No. 12797。

具体实施方式

实施例1：

以乳酸菌选择培养基对盐渍白菜（酸菜）发酵液进行培养，之后再37℃厌氧培养，按照常规方法分离得到短乳杆菌DM9218，已保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号：CGMCC No. 12797。

实验：

1．验证短乳杆菌DM9218分解嘌呤核苷的能力