[发明专利]一种棕色蘑菇液体菌种高密度生产方法

权利要求书

1.一种棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)菌种活化：

2)种子液的制备：取斜面培养基上的菌种接种于种子培养基中，摇床培养；

3)高密度发酵棕色蘑菇液体菌种：采用5L全自动发酵罐，发酵培养基的装液量为3L，初始葡萄糖为50g/L，接种量3％，25℃，通过控制通气量调整发酵中的溶氧控制；在发酵过程，通过自动控制流加2mol/L的氢氧化钠将发酵过程的pH恒定为6.0；第一阶段0-24h搅拌控制在100转/分钟，结合自动控制通气量调整溶氧控制在50％，第二阶段24h之后停止搅拌，通过控制通气量来实现溶氧控制，溶氧控制在30％，总培养时间100-160小时。

2.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法，其特征在于，所述斜面培养基(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨2，磷酸二氢钾1，七水硫酸镁1.5，菜园土600，麦粒100，琼脂25，121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法，其特征在于，所述种子培养基(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨2，磷酸二氢钾2，七水硫酸镁1，谷氨酰胺0.1，121℃灭菌20min。

4.根据权利要求1所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法，其特征在于，所述发酵培养基(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨10，磷酸二氢钾2，七水硫酸镁1，121℃灭菌20min。

5.根据权利要求1-4任一项所述棕色蘑菇液态菌种的高密度生产方法，其特征在于：

所述菌种活化步骤具体为：将棕色蘑菇菌种转接入试管固体培养基斜面中，放入恒温培养箱25℃培养至满管；

所述种子液的制备步骤具体为：取3块0.5cm²新鲜斜面菌种接种于种子培养基中，容器为100mL/500mL三角瓶，25℃，150r/min摇床培养5d；

所述高密度发酵棕色蘑菇液体菌种步骤具体为：总培养时间120小时。