[发明专利]一种检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法

权利要求书

1.一种检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，所述的方法为：

(1)制备待测样品

将泽泻汤标准颗粒研细混匀后，以料液质量体积比1：5～20加入甲醇水溶液中，制成泽泻汤标准颗粒液，然后在超声频率45KHz、超声功率100～300W的条件下超声处理10～30分钟，冷却至室温后添加甲醇水溶液补足重量至与初始泽泻汤标准颗粒液相等，之后摇匀、过滤，取滤液，获得待测样品；

(2)待测样品谱图检测

将步骤(1)制备的待测样品注入高效液相色谱仪进行检测，获得待测样品的高效液相色谱图；高效液相色谱仪的测试条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以蒸馏水为流动相A，以乙腈为流动相B进行梯度洗脱，梯度洗脱条件为：0～10min时流动相A的体积分数为60％，10～50min时流动相A的体积分数为60％～10％，DAD紫外检测器分别同时在208nm、222nm处检测吸收峰；

(3)制作白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B的标准曲线

将白术内酯III对照品用甲醇水溶液溶解，配制成浓度为5～50μg/ml白术内酯III对照品溶液，取白术内酯III对照品溶液以不同的进样量分别注入高效液相色谱进行检测，所述高效液相色谱仪的测试条件与步骤(2)中相同，其中DAD紫外检测器在222nm处检测吸收峰，分别获得进样量不同的白术内酯III对照品溶液的高效液相色谱图，以高效液相色谱图中白术内酯III吸收峰的峰面积为横坐标，以白术内酯III对照品溶液进样量为纵坐标，制作白术内酯III标准曲线；

将白术内酯III对照品替换为23-乙酰泽泻醇B对照品，DAD紫外检测器在208nm处检测吸收峰，按同样方法制作23-乙酰泽泻醇B标准曲线；

(4)泽泻汤标准颗粒含量测定

根据步骤(2)所得待测样品的高效液相色谱图中白术内酯III在222nm处、23-乙酰泽泻醇B在208nm处相应吸收峰的峰面积，以及步骤(3)制作的白术内酯III、23-乙酰泽泻醇B的标准曲线，计算待测样品中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B的含量，进而换算得到泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B的含量。

2.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，所述甲醇水溶液中甲醇的体积浓度为60％。

3.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的泽泻汤标准颗粒研细混匀后，以料液质量体积比1：10～15加入甲醇水溶液中。

4.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述色谱柱中填充剂的粒径为5μm。

5.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述色谱柱长为150mm、内径为4.6mm。

6.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，步骤(2)中，梯度洗脱时洗脱剂的流速为1.0ml/min。

7.如权利要求1所述的检测泽泻汤标准颗粒中白术内酯III和23-乙酰泽泻醇B含量的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述白术内酯III对照品溶液的浓度为10～20μg/ml。