[发明专利]一种检测试纸及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及农药残留检测技术领域，特别涉及一种用于检测农产品中啶虫脒的残留的检测试纸及其制备方法。

背景技术

在现有技术中，用于农药残留检测的试纸主要是针对氨基甲酸酯类和有机磷类农药，检测原理是利用有机磷或氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。此类试纸的使用范围有限，仅适用于有机磷或氨基甲酸酯类农药残留的检测。

啶虫脒属于氯代烟碱类杀虫剂,主要用于防治瓜果蔬菜上的蚜虫、小菜蛾等，它能够与烟碱乙酰胆碱受体作用，引起昆虫异常兴奋，全身痉挛麻痹而死。虽然啶虫脒在害虫防治上起到了重要作用，但同时对土壤和水资源造成了污染，此外食物上的农药残留还会对人类健康造成危害，因此检测啶虫脒残留对环境的可持续发展和人类的健康是非常必要的。农药残留检测常用的方法有色谱、色谱-质谱联用技术，但是这些技术检测成本高、需要专业的操作人员，不利于实现现场快速操作。

啶虫脒为小分子农药，本身不具备免疫原性，需要将其与大分子结合才能成为免疫原，生成抗体。抗体制备过程复杂，质量不稳定，且不易于储存，相对于其他农药更难检测，目前现有技术中并没有关于检测农产品中啶虫脒残留的检测试纸公开。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的缺陷，提供一种用于检测农产品中啶虫脒的残留的检测试纸。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一方面，本发明提供一种检测试纸，用于检测农产品中啶虫脒的残留，其中，所述检测试纸包括底板，设置于底板上的样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；所述金标结合垫的一端与所述样品垫的一端部分重叠，所述金标结合垫的另一端与所述硝酸纤维素膜的一端部分重叠；所述硝酸纤维素膜的另一端与所述吸水垫的一端部分重叠；所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线。

优选的，所述部分重叠的长度范围为1～3mm。

优选的，所述硝酸纤维素膜上吸附有结合物，所述结合物为生物素修饰的互补单链DNA与链霉亲和素的结合物。

优选的，所述金标结合垫上吸附有啶虫脒核苷酸适体修饰的胶金体。

优选的，所述啶虫脒核苷酸适体的寡核苷酸链为5’GCAGC GGTTC TTGAT CGCTG ACACC ATATT ATGAA GAAAA AAAAA AAAAA AAAAA AA-C6-SH3’。

优选的，啶虫脒核苷酸适体分子与胶体金粒子的数目比为2:1～9:1。

优选的，啶虫脒核苷酸适体修饰的胶金体复溶于缓冲液中吸附于所述金标结合垫上。

优选的，所述缓冲液包括蔗糖和吐温20；所述蔗糖的浓度为5～30％，所述吐温20的浓度为0.1-1％。

优选的，所述样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次粘贴于所述底板上。

另一方面，本发明还提供一种检测试纸的制备方法，所述制备方法包括分别制备样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，再将所述样品垫、金标结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次设置于底板上，使得所述金标结合垫的一端与所述样品垫的一端部分重叠，所述金标结合垫的另一端与所述硝酸纤维素膜的一端部分重叠；所述硝酸纤维素膜的另一端与所述吸水垫的一端部分重叠；所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述硝酸纤维素膜的制备方法包括将生物素修饰的互补单链DNA与链霉亲和素混合，吸附于硝酸纤维素膜上的检测线和质控线区域；所述金标结合垫的制备方法包括将啶虫脒核苷酸适体与胶体金按比例混合，得到啶虫脒核酸适体修饰的胶金体，将啶虫脒核酸适体修饰的胶金体复溶于缓冲液中，吸附于金标结合垫上。

本发明的有益效果在于：提供一种用于检测农产品中啶虫脒的残留的检测试纸及其制备方法，利用可以特异性识别啶虫脒分子的核酸适体作为识别元素，同时创造性的发现了核酸适体分子与胶体金粒子数目最优比，使得检测浓度可以达到0.2mg/mL。检测速度快，检测过程中需要时间少于10分钟，降低了试纸的生产成本，提高了试纸的稳定性，操作简单，不需要专业人员操作，普通人员按照说明进行操作即可，可以用于检测部门的现场检测以及普通市民对农产品的检测，易于推广使用。

附图说明

图1示意性示出根据本发明一个实施例的检测试纸的结构示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，而不构成对本发明的限制。