[发明专利]一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒有效
申请号: | 201611110779.8 | 申请日: | 2016-12-06 |
公开(公告)号: | CN106526169B | 公开(公告)日: | 2019-01-29 |
发明(设计)人: | 李玲 | 申请(专利权)人: | 四川沃文特生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/577 |
代理公司: | 成都顶峰专利事务所(普通合伙) 51224 | 代理人: | 杨俊华 |
地址: | 610000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 试剂盒 包被 磁珠 三碘甲状腺原氨酸 单抗 免疫测定试剂 灵敏度 生物素 抗体 单克隆抗体 酶工作液 磁微粒 解离剂 | ||
1.一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:包括羊单抗包被的磁珠、ANS解离剂和酶工作液,羊单抗包被的磁珠上标记有生物素;羊单抗包被的磁珠包被量为0.08~0.12μg/mg。
2.根据权利要求1所述的一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:所述羊单抗包被的磁珠制备方法为:将羊单抗稀释到设定的浓度,对稀释后的羊单抗进行生物素标记获得生物素抗体,将生物素抗体包被在裸磁珠上获得羊单抗包被的磁珠;所述设定的浓度为固定值。
3.根据权利要求2所述的一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:设定的浓度在0.1mg/mL~0.6mg/mL内取值。
4.根据权利要求1或2或3所述的一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:所述羊单抗包被的磁珠的制备方法为:
A、采用PBS缓冲液对羊单抗透析,取出透析完毕后的羊单抗;将透析完毕后取出的羊单抗稀释到设定的浓度;
B、将BNHS溶于DMSO中,配置成BNHS溶液;
C、将稀释后的羊单抗和BNHS溶液混合并反应,反应设定时间后,加入Tris缓冲液终止反应,获得生物素抗体;
E、采用PBS缓冲液对生物素抗体进行透析;
F、取出透析后的生物素抗体,生物素抗体包被裸磁珠,获得羊单抗包被的磁珠。
5.根据权利要求4所述的一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:所述羊单抗包被的磁珠的制备方法为:
A、采用0.1~0.3mol/L的PBS缓冲液对的羊单抗透析,透析的温度为2~8℃;取出透析完毕后的羊单抗,将羊单抗稀释到设定的浓度;
B、将BNHS溶于DMSO中,配置成8~12mmol/L的BNHS溶液;
C、将步骤A解析后的羊单抗和步骤B配制的BNHS溶液混合并反应28~33分钟;
D、用0.8~1.2mol/L的Tris缓冲液终止步骤C的反应;获得生物素抗体;
E、采用浓度为0.1~0.3mol/L的PBS缓冲液对生物素抗体进行透析,透析的温度为2~8℃;
F、向透析后的生物素抗体加入丙三醇,生物素抗体与丙三醇体积比为4:5~5:4;
G、生物素抗体包被裸磁珠,获得羊单抗包被的磁珠;用0.08~0.12%BSA的缓冲液对羊单抗包被的磁珠稀释到设定浓度。
6.根据权利要求1所述的一种用于测定三碘甲状腺原氨酸的试剂盒,其特征是:所述酶工作液为BSA的缓冲液和ALP标记的T3衍生物的混合溶液。
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