[发明专利]一种五小叶槭的组培快繁方法

说明书

本发明公开一种五小叶槭的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：取五小叶槭枝条清洗，灭菌，切取带芽茎段得到外植体；(2)初代培养：将所述步骤(1)得到的外植体接种到初代培养基中进行初代培养，诱导腋芽生成；(3)继代培养：将所述步骤(2)得到的腋芽接种到到增殖培养基中进行继代培养，诱导不定芽生成；(4)生根培养：继代培养：将所述步骤(3)得到的不定芽接种到生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，降低了人工成本，易于操作，可进行产业化生产。

技术领域

本发明涉及植物组培育苗技术领域，具体涉及一种五小叶槭的组培快繁方法。

背景技术

五小叶槭(Acer pentaphyllum Diels)是槭树科槭属落叶乔木，是我国特有的国家一级保护植物。分布仅限于四川雅砻江及其支流(木里、九龙、卡拉和麦地龙)海拔2200～3000m的河谷地带。人畜活动严重威胁到五小叶槭的生存，按照世界自然保护联盟(IUCN)濒危等级标准(IUCN 1994)，已属于极危物种，面临灭绝的边缘，急需抢救性保护。五小叶槭对研究槭树科植物的起源和演替具有非常重要的意义，同时也是不可多得的城镇园林景观树种。

目前，对五小叶槭的繁育方式研究主要为种子繁殖育苗技术。该方法繁殖时间较长，材料成本较高，大量繁殖存在一定的局限性。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种五小叶槭的组培快繁方法，所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

一种五小叶槭的组培快繁方法，包括以下步骤：

(1)外植体选取及灭菌：取五小叶槭枝条清洗，灭菌，切取带芽茎段得到外植体；

(2)初代培养：将所述步骤(1)得到的外植体接种到装有初代培养基的培养瓶中进行初代培养，生成腋芽，初代培养基组成包括：1/2MS基本培养基，附加0.05～0.5mg/L 6-BA、0.02～0.2mg/L TDZ、10～40g/L蔗糖、4～7g/L琼脂；

(3)继代培养：将所述步骤(2)得到的腋芽接种到增殖培养基中进行继代培养，生成不定芽，所述增殖培养基组成包括：WPM基本培养基，附加0.05～0.5mg/L 6-BA，0.2～1.0mg/L CPPU，10～40g/L蔗糖，4～7g/L琼脂；

(4)生根培养：将所述步骤(3)得到不定芽接种到生根培养基中进行生根培养，得到生根苗，所述生根培养基组成包括：WPM基本培养基，附加0.2～1.0mg/L NAA、10～40g/L蔗糖、4～7g/L琼脂。

优选的，所述外植体选取及灭菌过程具体：取五小叶槭幼嫩枝条，去除叶片，用酒精振荡处理30s，无菌水清洗1次，再用升汞振荡处理6～10min，无菌水清洗3～5次，无菌滤纸吸去水分，剪切成1～2cm的所述带芽茎段得到所述外植体。

优选的，所述酒精体积百分数为75％。

优选的，所述升汞质量百分数为0.1％。

优选的，所述初代培养过程光照强度为800～1200Lux，光照时间为14h/d.，培养温度为23～27℃。

优选的，所述初代培养过程光照强度为1000Lux。

优选的，所述初代培养过程培养温度25℃。

优选的，所述继代培养过程和所述生根培养过程光照强度为1300～1800Lux，光照时间为14h/d.，培养温度为23～27℃。

优选的，所述继代培养过程和所述生根培养过程光照强度为1500Lux。