[发明专利]孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种模型建立方法，具体地说是孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法，属于生物医学领域。

背景技术

原发性高血压由基因和环境因素相互作用导致的疾病，其是心血管疾病发生的主要风险因素，并对人类的健康构成了重大威胁。目前，大量的研究表明，孕期影响胎儿的环境因素，在成年后高血压，糖尿病及肥胖等疾病的发生发展中起着至关重要的作用。

长期暴露于低剂量脂多糖的人群易感染，酒精滥用及肠道紊乱，且已发现高剂量的脂多糖暴露可引起妇女细菌性阴道炎。脂多糖是革兰氏阴性菌的细胞壁的一种毒性成分，常寄居在动物和人的消化道内，且其常用于构建细菌感染的实验模型。大量研究表明，孕期脂多糖暴露可随后引起高血压，心肌纤维化，肥胖，异常睾丸发育，及阿尔茨海默氏病。

基于医学研究的伦理要求，目前尚无法通过临床试验来研究孕期脂多糖导致子代大鼠高血压疾病中的具体作用及其机制。因此，建立子代大鼠高血压疾病模型，可用于研究原发性高血压疾病的发生、发展机制及开发对抗药物为目的的医学基础和临床研究。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的不足，提供一种操作简单方便、培育高效的孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法。

按照本发明提供的技术方案：孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、配制脂多糖溶液；

(2)、选取符合标准的孕鼠，分别在孕鼠孕期的第8、10、12天，采用腹腔注射方式注射1次步骤(1)配制好的脂多糖溶液，脂多糖的单次剂量不超过0.80mg/kg，不低于0.77mg/kg；

(3)、饲养注射了脂多糖的孕鼠及其繁殖的子代大鼠；

(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期进行收缩压测定，收缩压达到131.5～136.7mm Hg的16周子代大鼠即为孕期脂多糖导致高血压的子代大鼠。

作为本发明的进一步改进，所述脂多糖溶液要求现配现用，按每1mg脂多糖中加入0.9～1.1ml生理盐水的比例进行配制，并充分混合摇匀。

作为本发明的进一步改进，所述脂多糖溶液的混合摇匀时间控制在20分钟左右。

作为本发明的进一步改进，所述脂多糖与生理盐水的配制比例为每1mg脂多糖中加入1ml生理盐水。

作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中符合标准的孕鼠是指7～8周龄的体重为250～270g的SD成年大鼠。

作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中，选取孕鼠的腹部脐与髂前上棘连接线外1/3点为注射部位。

作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中，注射脂多糖的单次剂量为0.79mg/kg。

作为本发明的进一步改进，所述步骤(3)中，饲养注射了脂多糖的孕鼠及其繁殖的子代大鼠的方法为：所有的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑夜循环，幼鼠经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠。

作为本发明的进一步改进，所述步骤(4)中测定收缩压的方法为尾套法。

作为本发明的进一步改进，所述尾套法具体操作是：测前将子代大鼠置于33～35℃的温热室内13～17分钟，以引起尾血管扩张；然后将子代大鼠放置在限制件中，并将具有气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其平均值。

本发明与现有技术相比，具有如下优点：本发明操作简单方便，能够准确高效地培育出孕期脂多糖导致高血压的子代大鼠，从而为高血压疾病的致病机制、诊断、治疗以及预防的研究提供一种新的途径和可能。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。

药品试剂：脂多糖(LPS)，生理盐水。

试验动物：7～8周龄的体重为250～270g的孕1天的SD成年大鼠【购自北京维通利华公司】。

主要仪器：一次性5、10ml无菌注射器；一次性3ml无菌吸管；大鼠无创血压仪【BP 2010A，日本软龙公司】；大鼠操作台。

实施例1：【实验组1】

(1)、配制脂多糖溶液：现配现用，按每1mg脂多糖中加入1ml生理盐水的比例进行配制，并充分混合摇匀，混合摇匀的时间控制在20分钟左右，配好之后备用；如果脂多糖溶液本次未使用完，不建议下次继续使用。