[发明专利]一种脐带保存液及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学领域，具体的说是涉及一种脐带保存液及其应用。

背景技术

脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构，其外被羊膜，内含2条脐动脉、1条脐静脉，在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织-华尔通氏胶(Whartonps Jelly)，从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)。

1991年McElreavery首次从人脐带华通氏胶分离培养出一种具有多项分化潜能的成纤维样细胞，即人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)。hUC-MSCs比来源于骨髓、脂肪以及其他组织的MSCs更具有优势，首先，脐带来源不受伦理争议，并且成本较低；其次，hUC-MSCs不会引起畸胎瘤，并且具有抑癌性，由于hUC-MSCs还具有低免疫原性、免疫调节、基质支持、旁分泌、迁移和基因稳定性，故具有良好的临床治疗潜能。

脐带在采集、运输、分离的过程中都需要处于无菌状态，由于孕妇分娩时间的不确定性，脐带在采集后不能完全保证马上用于原代分离，大多数情况下都需要保存一段时间，脐带保存液的功效决定了脐带原代分离的成功率，传统采用将脐带组织浸没在含多种组分的PBS中，例如专利CN101868536A公开了一种保存液，配方为186μg/mL CaCl₂·2H₂O，400μg/mL KCl，60μg/mL KH₂PO₄，200μg/mLMgSO₄·7H₂O，8000μg/mL NaCl，350μg/mL NaHCO₃，90μg/mL NaH₂PO₄·7H₂O，2000μg/mL葡萄糖、及青霉素和链霉素的1％等摩尔混合物。但是，这种PBS保存液配制较为复杂和繁琐，自行配置工作量较大，而购买成品，因为其价格昂贵导致成本增加。

针对上述问题，现有专利CN102550543A公开了一种成分简单的脐带保存液，由生理盐水、青霉素和链霉素组成。虽然在该保存液制备上比较简单，而且成本也较低，但是在保存脐带的效果方面却较差，易造成脐带肿胀或遍体通红，而且保存的脐带在制备hUC-MSCs时，爬出细胞所需天数普遍较长。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于一种脐带保存液及其应用，使得所述脐带保存液组成简单，同时保证脐带较好的保存效果，减少hUC-MSCs爬出细胞所需天数。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种脐带保存液，包括生理盐水、葡萄糖、维生素H、叶酸、青霉素和链霉素。

针对现有脐带保存制剂成分复杂以及保存效果不佳的问题，本发明简化保存液中的成分，同时从脐带的保存效果角度考虑，选择几种适宜的组分组成一种能够保证脐带较好的保存效果，减少hUC-MSCs爬出细胞所需天数的新型脐带保存液。

其中，作为优选，葡萄糖浓度为2000-4000mg/L，维生素H浓度为0.1-0.6mg/L，叶酸浓度为1.0-5.0mg/L，青霉素含量为10kU/mL，链霉素含量为10mg/mL。在本发明具体实施方式中，上述各组分浓度可选择如下：

(1)葡萄糖浓度为2000mg/L，维生素H浓度为0.2mg/L，叶酸浓度为2.0mg/L，青霉素含量为10kU/mL，链霉素含量为10mg/mL；

(2)葡萄糖浓度为4000mg/L，维生素H浓度为0.6mg/L，叶酸浓度为5.0mg/L，青霉素含量为10kU/mL，链霉素含量为10mg/mL；

(3)葡萄糖浓度为3000mg/L，维生素H浓度为0.4mg/L，叶酸浓度为3.0mg/L，青霉素含量为10kU/mL，链霉素含量为10mg/mL。

此外，为了能够及时掌握保存液是否已经产生变质，本发明保存液中还可以加入酚红。优选地，所述酚红的浓度为5.0mg/L。