[发明专利]一种枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕制备大豆肽的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种微生物发酵技术，特别涉及一种枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕制备大豆肽的方法。

背景技术

大豆豆粕作为一种功能饲料，在饲料加工行业中得到广泛应用，但是豆粕中也含有许多抗营养因子，不利于人体吸收，甚至对生长健康有一定的影响，因此需要改善大豆豆粕的品质。枯草芽孢杆菌作为一种常见细菌，被国家首先列为工业发酵模式菌株，它能发酵豆粕，水解大豆蛋白生成人体易吸收的小分子肽及氨基酸，还能去除某些抗营养因子，减轻豆腥味。枯草芽孢杆菌发酵生产的大豆肽还具有一定抗氧化、降血糖、降血脂、增强机体免疫力等功能，所以在功能食品、保健食品和医药等行业具有一定的应用前景。张蕾等通过对枯草芽孢杆菌BSD-2发酵培养及优化，得到高产抗菌肽的培养基为蛋白胨14.29g/L、淀粉14.07g/L、豆饼粉6.49g/L、CaCO₃2.0g/L、MgSO₄1.0g/L，抗菌肽产量为原来的1.77倍。范远景等研究枯草芽孢杆菌发酵猪血粉制备猪血多肽，得到最佳发酵工艺参数为：温度30℃、转速160r/min、初始pH值7.5、接种量6%、发酵时间50h。刘心凤等研究枯草芽孢杆菌BSG1产蛋白酶条件，优化得到最佳培养基为大豆粉2%、玉米粉1%、硫酸镁0.6%、最佳培养调价为培养基起始pH7.0、摇瓶装液量150/500mL、接种量5%、摇床转速280r/min、35℃发酵24h，在这条件下蛋白酶酶活为优化前的1.13倍。

本发明在摇瓶条件下，对谷草芽孢杆菌ZC1产大豆肽的培养基进行优化；在此基础上进行10L发酵罐发酵，对枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕产大豆肽的工艺条件进行优化，得到的大豆肽产品纯度较高，且降低了生产成本。

本发明采用黑曲霉通过麸皮发酵后能够产生外切蛋白酶：酸性蛋白酶，所以能用来脱苦大豆肽，效果良好。

发明内容

本发明的目的是提供一种黑曲霉脱苦大豆肽的方法，脱苦前后大豆肽分子量的变化较小，而苦味值明显下降。

为实现上述的目的，本发明采用的技术方案为：

（1）制作培养基：

枯草芽孢杆菌ZC1高浓度基质培养基：豆粕粉25g/L、葡萄糖6g/L、氯化钠8g/L；

基础发酵产大豆肽培养基：豆粕粉60g/L、麦芽糖15g/L、磷酸二氢钾8.52g/L。

（2）制作种子液：从步骤（1）活化好的斜面中挑取一到两环枯草芽孢杆菌ZC1菌种到豆粕培养基中，在温度37℃、摇床转速200r/min、初始pH7.5、接种量4%的条件下，培养18h。

（3）将步骤（2）中得到的种子液放入10L的发酵罐中，发酵罐搅拌速率150r/min、通气量5L/min、发酵温度37℃、添加60mL植物油，保持48h。

（4）将步骤（3）中发酵后的大豆肽进行分离、过滤、真空浓缩、喷雾干燥、筛分，得到大豆肽产品。

本发明采用枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕来制备大豆肽，中性蛋白酶和大豆肽转化率可分别达到852.5U/mL和76.73%，大豆肽产品的纯度较高，具有良好的应用价值。

附图说明

无。

具体实施方式

为了使本发明的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。

我们采用本发明公开的方法，进行以下操作：

（1）制作培养基：

枯草芽孢杆菌ZC1高浓度基质培养基：豆粕粉25g/L、葡萄糖6g/L、氯化钠8g/L；

基础发酵产大豆肽培养基：豆粕粉60g/L、麦芽糖15g/L、磷酸二氢钾8.52g/L。

（2）制作种子液：

从步骤（1）活化好的斜面中挑取一到两环枯草芽孢杆菌ZC1菌种到豆粕培养基中，在温度37℃、摇床转速200r/min、初始pH值7.5、接种量4%的条件下，培养18h。

（3）将步骤（2）中得到的种子液放入10L的发酵罐中，发酵罐搅拌速率150r/min、通气量5L/min、发酵温度37℃、添加60mL植物油，保持48h。

（4）将步骤（3）中发酵后的大豆肽进行分离、过滤、真空浓缩、喷雾干燥、筛分，得到大豆肽样品。

在10L发酵罐中，枯草芽孢杆菌ZC1发酵豆粕产大豆肽的过程中，中性蛋白酶酶活和大豆肽转化率都是先增高后降低，在发酵48h左右达到峰值，分别为：852.5U/mL和76.73%。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的思想和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。