[发明专利]测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法

说明书

本发明公开了一种测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法，它包括以下步骤：(1)甘草酸标准曲线的建立：a、对照品溶液的制备；b、对照品溶液的测定；(2)待测样品中甘草酸的含量测定：c、供试品溶液的制备；d、供试品溶液的测定。本发明成功建立了测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法，可以简便、快速、准确地测定甘草制雪胆中甘草酸的含量，可以监控甘草制雪胆中的活性成分含量，真实地反映药品的内在质量，为甘草制雪胆的质量控制提供了有效保障。

技术领域

本发明涉及药材检测领域，具体涉及甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法。

背景技术

雪胆为葫芦科雪胆属植物长果雪胆Hemsleya dolichocarpa W.J.Chang、峨眉雪胆Hemsleya omeiensis L.T.Shen et W.J.Chang或巨花雪胆Hemsleya giganthaW.J.Chang的干燥块根。

甘草制雪胆为用质量比0.4倍量的甘草汁闷润7.5h后，80℃烘干12h后晾干的雪胆制品。甘草制雪胆具有清热解毒，消炎止痛的功效，用于治疗菌痢，肠炎，支气管炎，急性扁桃体炎，虚火牙痛，胃痛等疾病。

甘草酸及甘草酸盐是甘草清热解毒的有效成分也是甘草质量控制的指标成分，甘草酸还是是甘草甜味的主要成分(张明发,沈雅琴.甘草及其活性成分抗炎与抗炎机制的研究进展[J].现代药物与临床,2011,04:261-268；韩瑶聃,王彬,王政雨,张亚弢,杨凌云,周金培,张惠斌.甘草酸药理作用的研究进展[J].中国新药杂志,2012,21:2499-2505；李志华,颜苗,张毕奎,李焕德,方平飞.基于药动学的甘草配伍减毒机制研究进展[J].中草药,2015,23:3611-3616.)。

因此，为了确保甘草制雪胆的质量和药效，需要一种能准确、可靠测定甘草制雪胆中甘草酸含量的方法。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法，它包括以下步骤：

(1)甘草酸标准曲线的建立：

a、对照品溶液的制备：

取甘草酸对照品，加甲醇配制成对照品溶液；

b、对照品溶液的测定：

配制系列浓度的对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪检测，测定色谱峰面积，得到甘草酸的标准曲线；

色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；

检测波长：250nm；

流动相：A为乙腈；B为0.05％磷酸水溶液，梯度洗脱程序如下：

(2)待测样品中甘草酸的含量测定：

c、供试品溶液的制备：

取待测样品，加甲醇提取，过滤得供试品溶液；

d、供试品溶液的测定：

取供试品溶液，注入高效液相色谱仪，以步骤b相同的色谱条件检测，根据步骤(1)的标准曲线得到待测样品中甘草酸的含量。

进一步地，所述色谱条件的柱温为25℃～35℃，优选30℃。

进一步地，所述色谱条件的流速0.8～1.2mL/min；优选流速1.0mL/min。

进一步地，所述色谱柱的规格为：内径4.6mm，长度250mm，填料粒径5μm。

进一步地，所述色谱柱为Diamonsil-C18柱。

进一步地，步骤(3)中，所述甲醇的浓度为70％。