[发明专利]一种利用生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法

权利要求书

1.一种利用生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法，其特征在于，包括

方法一，配置添加了生物质炭培养基的抑制法，

方法二，将添加了生物质炭培养基的pH调节回培养基原始pH的抑制法，

方法三，配置菌土抑制法。

2.根据权利要求1所述利用生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法，其特征在于，方法一包括如下步骤：

配置燕麦培养基：燕麦片33g，琼脂粉18g，去离子水1000ml，

在燕麦培养基的配置过程中加入不同比例的稻壳炭和/或烟草秸秆炭并测定相应的pH值；

接种黑胫病菌株并采用十字交叉法测定菌落直径，以培养2d的菌落直径变化计算黑胫病菌菌丝的生长速率及抑制率。

3.根据权利要求1所述生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法，其特征在于，方法二包括如下步骤：

配置燕麦培养基：燕麦片33g，琼脂粉18g，去离子水1000ml，

在燕麦培养基的配置过程中加入不同比例的稻壳炭和/或烟草秸秆炭并测定相应的pH值；接着用0.1mol的HCl或NaOH溶液将变化的pH值调回到初始值，初始值为不加生物质炭的培养基所对应的pH值，

灭菌后进行接菌实验，培养结束后，挑取菌丝置于载玻片上，在显微镜下观察黑胫病菌菌丝形态的变化。

4.根据权利要求1所述生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法，其特征在于，方法三包括如下步骤：

菌谷准备：将谷子加水煮开至半数谷粒呈开花状，装入500ml三角瓶中，121℃高压灭菌20 min；在无菌条件下，取1cm×1cm的烟草黑胫病菌菌块转接到盛有菌谷的三角瓶中，28℃培养14d备用；

菌土准备：将灭菌的土壤与生物质炭（稻壳炭和/或烟草秸秆炭）按不同比例（0，1%，2%，4%，10%，20%）混合，装入直径9cm、高7cm的花盆中，先装3/4的混合土，均匀加入菌谷0.5g/盆，将剩余1/4的混合土填满，浇透水，置于人工气候室内一个月，保持高温高湿；

移栽：将苗龄60天左右的烟苗移栽到花盆中，每盆一株；

每个处理10盆，重复3次，置于人工气候室培养，白天30℃/黑夜28℃，光照12h/黑暗12h，相对湿度95%，移栽后于第5、7、9天调查烟苗的发病级数，并进行记录，计算病情指数和防治效果；

病情指数=∑（各级病株数×级数）/（最高病级数×调查总株数）×100，防治效果=（对照组病指-处理组病指）/对照组病指×100%。

5.根据权利要求1所述利用生物质炭抑制烟草黑胫病菌的方法，其特征在于，生物质炭为稻壳炭和/或烟草秸秆炭，

稻壳炭：烟草秸秆炭为0-20g/L:20-0g/L。