[发明专利]卡泊三醇起始原料A及相关杂质的分离与测定方法

权利要求书

1.利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用色谱柱Agilent ZORBAX SIL，4.6×250mm，5μm；以体积比为90-100：0-10的正己烷和异丙醇的混合液作为流动相进行分离，分离后采用蒸发光检测器对起始原料A及相关杂质进行检测；1)所述相关杂质为式Ⅱ、式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ所示化合物中的一种或多种时，所述蒸发光检测器的漂移管温度为42℃；2)和/或所述相关杂质为式Ⅵ所示化合物时，所述蒸发光检测器的漂移管温度为52.5℃；所述相关杂质的结构式如下：

2.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，对起始原料A和式Ⅵ所示的化合物进行分离时，正己烷与异丙醇的体积比为99.5：0.5。

3.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，对起始原料A和式Ⅱ、式Ⅲ、式Ⅳ、式Ⅴ所示的化合物进行分离时，正己烷与异丙醇的体积比为90：10。

4.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.5-1.5ml/min。

5.根据权利要求1所述的利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，所述的方法具体包括以下步骤：

(1)配制相关杂质的对照品溶液贮备液，然后根据对照品溶液贮备液配制相关杂质的对照品定位溶液和对照品标准曲线溶液；

(2)配制供试品溶液；

(3)取相关杂质的对照品定位溶液与供试品溶液混合配制得混合溶液；

(4)分别取相关杂质的对照品定位溶液、对照品标准曲线溶液、混合溶液及供试品溶液进样，记录色谱图，以浓度μg/ml对数lgX与峰面积对数lgY作线性回归，计算回归方程及相关系数，将供试品溶液中杂质峰面积对数lgY’代入回归方程计算相关杂质含量。

6.根据权利要求5所述的利用高效液相色谱法分离测定卡泊三醇起始原料A及相关杂质的方法，其特征在于，所述步骤(1)-(4)中，配制各溶液所采用的稀释剂为正己烷和/或异丙醇。