[发明专利]一种半枫荷种子萌发途径的组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物组织培养技术领域，尤其涉及一种半枫荷种子萌发途径的组培快繁方法。

背景技术

半枫荷(Semiliquidambar cathayensis H.T.Chang)为金缕梅科半枫荷属植物,为1962年发表的新属半枫荷属的模式种,我国特有种。该种在学术研究、中医药用以及园林应用等很多方面都具有极高的价值。但由于不合理的开发利用,其资源破坏严重。半枫荷在1987年国家环境保护局等颁布的《中国珍稀濒危保护植物名录(第一册)》中,被列为国家三级重点级保护植物^[2]；在1992年傅立国主编的的《中国植物红皮书-稀有濒危植物》中被列为稀有种^[3]；在国务院1999年8月4日颁布的《国家重点保护野生植物名录(第一批)》中提升为国家Ⅱ级保护植物。2003年在汪松、解焱主编的《中国物种红色名录》中,专家根据相关资料,推测半枫荷在过去3个世代内致危因素没有停止,种群至少减少30％,因此将半枫荷列入易危等级,在未来一段时间内其种群面临绝灭的几率较高^[5]。

半枫荷药用价值：半枫荷是一种珍贵的药用植物，根、枝、树皮都可入药，能活血通络，祛风除湿，可以治疗风湿性关节炎，腰肌劳损，半身不遂，跌打瘀积、肿痛、产后风瘫，外伤常用于止血，是产区群众常用的中药。目前，半枫荷作为重要的中药已得到了广泛的重视和开发。如半枫荷散、中药巴布剂、半枫荷类注射液、苗岭骨力胶囊等。

药用半枫荷种类鉴别：在我国不同地方，叫“半枫荷”并作药用的植物共有6科8属15种，如五加科的枫荷桂(Dendvopanax dentigerus)，梧桐科的翻白叶树(Pterospermum heterophyllum)，以及樟科的檫树(Sassafras tzumu)，效用和金缕梅科的半枫荷相同，都是用根、茎或树皮入药，但金缕梅科的半枫荷(Semiliquidambar cathayensis H.T.Chang)功效最佳^[9-10]。

2.半枫荷现有组织培养技术情况

在半枫荷组织培养方面，陈世红等^[11]采用单因子比较和均匀设计法，分别研究了影响半枫荷愈伤组织诱导和生长的各种因素。试验结果表明：叶片愈伤组织诱导率高于茎段；愈伤组织诱导的最适基本培养基为MS，生长的最适培养基为：MS+6-BA2.0mg/L+NNA1.0mg/L+蔗糖3％，暗培养对愈伤组织生长极为有利，在生根培养基上诱导生根，但多次试验均未见不定根发生。

李国桢等^[12]采用均匀设计和单因子比较法，考察不同基本培养基，光照条件，蔗糖浓度，以及不同激素种类、浓度和组合对半枫荷愈伤组织诱导、继代培养和再分化的影响。实验结果表明：叶片愈伤组织诱导率高于茎段。愈伤组织诱导的最适基本培养基为MS，生长的最适培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖3％。黑暗培养对愈伤组织生长极为有利。但生根培养基上诱导生根，但经多次试验均未见不定根发生。

胡刚等濒危植物半枫荷Semiliquidambar cathayensis组织培养快繁技术研究，以当年生半枫荷带腋芽的茎段和幼叶作为外植体，开展组织培养。研究结果表明：半枫荷叶片在初代培养基：MS+BA2.0mg/L+NNA0.5mg/L上，愈伤组织诱导率为92％，芽诱导率为16.7％，腋芽在初代培养基：MS+BA1.0mg/L+NNA0.1mg/L上，腋芽诱导率为58％，茎段能直接诱导出芽是半枫荷快繁的主要外植体。新生芽在继代增殖培养基：MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L上，芽增殖系数为3.93，增殖培养基：MS+BA(1～0.5mg)/L+NAA(0.01～0.05mg)/L，较好丛生芽生根培养基以1/2WPM+NAA2mg/L+活性碳0.2％为宜。生根率可达到90％以上。松林腐殖土+珍珠岩(4：1)比较适合半枫荷的生长移栽成活率100％，苗木长势好，叶绿色，可提供半枫荷优质种苗。

3.现有组织培养技术的不足

半枫荷对生态环境的要求比较苛刻，其自然繁殖率较低，加上人们长期的过量采挖，野生资源已经极度枯竭。面对这样严峻的形式，可见对半枫荷的人工繁殖问题的研究是极其的重要。植物组织无菌培养方法是寻求解决半枫荷资源枯竭、保护其优良品种的有效途径。近年来，人们对半枫荷的药用成分及价值的研究日益增多，目前对半枫荷从种子萌发，到增殖壮苗生根的完整流程的无菌组织培养研究还未见报道，组培无菌培养快速繁殖方面多以茎段和叶片为外植体诱导。