[发明专利]一种复方丹参滴丸提取物的氢核磁共振检测方法

说明书

技术领域

本发明提供一种基于氢核磁共振技术的复方丹参滴丸提取物中主要成分的定量分析方法，所述分析方法可以鉴定出提取物中的20个化合物，其中酚酸类化合物6种，皂苷类3种，糖类4种，氨基酸类3种，有机酸类4种，同时，可以测定其中的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、丹参素、丹酚酸B、迷迭香酸和原儿茶醛6种主要成分的含量，能够实现对复方丹参滴丸提取物的全面、快速的质量评估。

背景技术

建立严格的中药质量标准和创建现代中药工业生产质量控制技术，确保中药产品的安全、有效和稳定，是中药现代化研究领域的前沿课题，也是我国医药工业面临的重大科技创新任务。因此，为更加全面、快速、准确地反映生产过程中复方丹参滴丸的整体质量状况，有必要采用核磁共振(NMR)技术对现有的标准做进一步升级，以提高中药产品生产中的质量控制水平，确保产品质量的稳定性。核磁共振，是指核磁矩不为零的原子核，在外磁场的作用下，核自旋能级发生塞曼分裂，共振吸收某一特定频率的射频辐射的物理过程。目前，日本药典已收录NMR分析方法用于中药材、汉方药物制剂的质量评估。

为更加全面、快速、准确地反映生产过程中复方丹参提取物(浸膏)的整体质量状况，本发明首次采用定量氢核磁(qHNMR)技术建立了用于复方丹参滴丸生产质量控制的非色谱定量分析方法，既可进行产品中间体的“宏观定性”，还可对其中主要成分—丹参素、原儿茶醛和丹酚酸B进行准确的定量分析，以期提高产品生产中的质量控制水平，确保产品质量的稳定性。

定量氢核磁共振法(quantitative 1H nuclear magnetic resonance，qHNMR)，即采用氢核磁共振技术对化合物进行定量分析的一种方法。

复方丹参滴丸是由丹参、三七、冰片3味中药制成，目前市场上有售，市售复方丹参滴丸说明书的主要内容如下：

【功能主治】活血化瘀，理气止痛。用于气滞血瘀所致的胸痹、症见胸闷、心前区刺痛冠心病心绞痛见上述证候者。

【主要成分】复方丹参滴丸主要成分：丹参、三七、冰片。

【包装规格】薄膜衣滴丸每丸重27mg，180丸/瓶。

【用法用量】口服或舌下含服，一次10丸，一日3次，4周为一个疗程；或遵医嘱。

有关文献中也公开了其制备方法如：

配方：丹参82.87％，三七16.21％，冰片0.92％。

制备方法：

⑴丹参、三七用8倍重量的水煮沸提取2次，第一次2小时，第二次1小时，混合提取液。

⑵提取液过滤浓缩。

⑶以提取物和冰片一起作为药物活性成分，基质为聚乙二醇，投料比为：提取物药物：基质＝1：5.5，加入冰片，液体石蜡为冷凝剂，药物温度90℃，化料时间1.5小时，冷凝液温度1℃，滴距7cm，滴速每分钟35滴制备成滴丸。

复方丹参滴丸在制备过程中需要制备丹参，三七的提取物，为了对丹参，三七的提取物进行质量控制，需要寻找有效，快速，准确的鉴定方法，本发明对此进行了研究，并找到一种方法对其进行检测，所述方法可以最大限度的达到上述要求为控制药品质量提供依据。

发明内容

本发明提供一种中药复方丹参滴丸提取物的氢核磁共振检测方法，所述方法包括如下步骤：

步骤1，工作液的制备

称取内标物3-(三甲基甲硅烷)丙二酸-d4钠盐，以氘代甲醇溶液溶解制成工作液；

步骤2，标准品溶液的制备

称取丹参素、丹酚酸B、迷迭香酸、原儿茶醛、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1标准品用氘代甲醇溶液溶解制成标准品溶液；

步骤3，供试品溶液的制备

称取复方丹参滴丸提取物干粉，加入工作液，经过提取分离得到供试品溶液；

步骤4，测定

将标准品溶液和供试品溶液注入超导核磁共振波谱仪，得到核磁共振波谱图；

步骤5，根据所得核磁共振波谱图中与丹参素、丹酚酸B、迷迭香酸、原儿茶醛、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对应的质子峰峰面积，计算各组分的含量；

其中，步骤4所述超导核磁共振波谱仪设定的氢核磁测试条件如下：

采用25-35°脉冲序列采集样品溶液的1H NMR图谱,测定温度290-310K，观测频率590-610MHz，谱宽12330-12340Hz，采样数据点65530-65540，扫描次数8-64次，延迟时间0.9-1.1s，采集时间2.6560-2.6570s，接受增益120-180，用TSP信号定标；