[发明专利]新疆圆柏总黄酮提取物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及新疆圆柏技术领域，是一种新疆圆柏总黄酮提取物及其制备方法和应用；按下述方法得到：将新疆圆柏枝叶粉碎干燥后脱脂，脱脂后用乙醇溶液回流提取，提取后浓缩，经硅胶柱除杂，再经大孔树脂富集纯化后得到本发明新疆圆柏总黄酮提取物；本发明较传统方法具有以下优点：（1）避免了酸和铅盐的使用，具有成分稳定、不易水解和无重金属残留；（2）利用硅胶除去油溶性杂质后，可有效降低大孔树脂的污染，大孔树脂再生容易；（3）可在密闭环境下实现对新疆圆柏中的黄酮类成分富集纯化，且总黄酮含量高、工艺方法操作简单、成本低、无污染；同时本发明新疆圆柏总黄酮提取物具有较好的抗炎镇痛作用，可用于关节炎疾病的治疗。

技术领域

本发明涉及新疆圆柏技术领域，是一种新疆圆柏总黄酮提取物及其制备方法和应用。

背景技术

新疆圆柏Juniperus sabina，又名砂地柏、叉子圆柏和臭柏等，为柏科圆柏属植物常绿匍匐灌木，广泛分布于我国新疆、甘肃、内蒙和陕北的干旱荒山和沙地之中。由于具有较好地抗风蚀、保持水土、固沙护坡以及改善环境的能力，该植物在上述地区已开始大面积栽培种植。新疆圆柏枝叶在我国民间常用于风湿性关节炎、类风湿性关节炎等疾病的治疗，被收载于《维吾尔药志》、《新疆中草药手册》和《中国沙漠药用植物》等医药文献中。目前，国内外对新疆圆柏的研究主要集中在其化学成分及生态学方面，在药理作用上的相关研究较少。近年来仅报道了抗菌、抗炎、抗氧化和杀虫等方面的生物活性，其中西北农林科技大学已就新疆圆柏的杀虫活性申请了多篇发明专利（ZL200310122231.1, ZL9405885.9）。新疆圆柏包含黄酮、木脂素和萜类等多种类型的化学成分，其中黄酮类化合物是新疆圆柏的主要特征性化合物之一。经对有关黄酮提取工艺现有技术文献的检索发现，田旭平在《新疆圆柏的提取、精制与抗氧化作用的研究》（新疆大学硕士学位论文）一文中提出：用三种不同的方法纯化新疆圆柏总黄酮。其中醋酸铅沉淀法，总黄酮含量为53%；阳离子树脂法，总黄酮含量为18%；酸化法，总黄酮含量为63%。这三种方法的不足之处在于：阳离子交换树脂法得到的总黄酮纯度低；酸化法容易使黄酮苷水解成苷元；醋酸铅沉淀法操作繁琐，且引入了重金属。新疆圆柏枝叶中存在大量的油溶性物质，许芳在《新疆圆柏有效成分及其总黄酮对大鼠佐剂性关节炎抑制作用的实验研究》（新疆医科大学硕士学位论文）一文中采用大孔树脂聚酰胺联用的方法对新疆圆柏枝叶中的黄酮类成分进行富集纯化，所得到的总黄酮提取物黄酮含量高，但其油溶性成分除不干净，影响总黄酮提取物的质量，也影响大孔吸附树脂的再生。

发明内容

本发明提供了一种新疆圆柏总黄酮提取物及其制备方法和应用，克服了上述现有技术之不足，其能有效解决现有提取新疆圆柏总黄酮的方法存在总黄酮含量低、易使黄酮苷水解成苷元、操作繁琐且引入了重金属、脂溶性成分除不干净影响总黄酮提取物的质量，也影响大孔吸附树脂再生的问题。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种新疆圆柏总黄酮提取物，按下述方法得到：第一步，将新疆圆柏枝叶粉碎后干燥，干燥后得到混合药材，混合药材用石油醚脱脂，在石油醚脱脂后的药材中加入乙醇溶液煮沸后回流提取1次至3次，提取后合并提取液并浓缩，得到一次浸膏；第二步，将一次浸膏和硅胶混合拌样后干燥，干燥后装入已装填好的硅胶填料层析柱，先用石油醚和乙酸乙酯的混合溶液进行二次脱脂，再用乙醇溶液进行洗脱并收集乙醇洗脱液，乙醇洗脱液浓缩后，得到二次浸膏；第三步，将二次浸膏加去离子水稀释后得到稀释液；第四步，大孔树脂柱对稀释液进行吸附，吸附后用去离子水进行洗脱，去离子水洗脱后用乙醇溶液进行洗脱并收集乙醇洗脱液，乙醇洗脱液浓缩并干燥后，得到新疆圆柏总黄酮提取物。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：

上述在第一步中，每次回流提取时乙醇溶液的加入量为混合药材质量的6倍至20倍；或/和，每次提取时间为1h至2h，每次回流提取时乙醇溶液为体积百分比为50%至70%的乙醇水溶液。

上述在第一步中，提取后合并提取液并浓缩，浓缩至在温度为25℃下的相对密度为1.05至1.20后，得到一次浸膏。