[发明专利]怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，尤其是一种怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法。

背景技术

怀珍珠菊是温县农业科学研究所采用系统选育法培育出的怀菊花品种，多年生草 本植物，茎带紫色无棱，直立，丛生，高85-110厘米，分枝较少，全身密被白色茸毛，基部长木 质化，单叶互生，卵状披针形，叶片灰绿色，叶裂较深，叶长4.9厘米，宽3.3厘米，柄长1.6厘 米，头状花序，顶生或腋生。花呈扁球形，直径2.5厘米，花序外围舌状花数层呈多轮状排列， 色泽初白后变粉红，经霜变红，中间为黄色管状花，花期10月中下旬。怀珍珠菊“色、香、味、 形”称四绝，以蕾入药或泡茶，长饮，清热解毒，养肝明目，利血脉；泡开后，清馨扑鼻，乃居 家、旅游、馈赠之珍品。怀珍珠菊性微寒、微甘，归肺、肝经，含嘌呤、胆碱、小苏碱、氨基酸等 多种对人体有益成分。

怀珍珠菊苗主要靠传统的分株法进行繁殖，导致繁殖速度慢，且怀珍珠菊长势不 良，分株苗不整齐，组织培养能够实现怀珍珠菊的快速繁殖，而国内对怀珍珠菊的研究较 少。

愈伤组织培养是一种最常见的培养形式，除茎尖分生组织培养和一部分器官培养 以外，其他几种植物组织培养形式最终都要经历愈伤组织才能产生植株，此外愈伤组织还 常常是悬浮培养的细胞和原生质体的来源。愈伤组织分为胚性愈伤组织和非胚性愈伤组 织，胚性愈伤组织是指体细胞胚的愈伤组织，经过分化成幼嫩的植株。

目前，国内外已经报道了较多怀珍珠菊的组织培养技术，但是怀珍珠菊组织培养 技术仍存在愈伤组织诱导困难、生根率和生根质量不高的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法，这种怀珍珠菊愈伤组织 的诱导方法可以解决愈伤组织诱导困难、生根率和生根质量不高的问题。

为了解决上述问题，本发明采用的技术方案是：

这种怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法为：以怀珍珠菊腋芽为外植体，首先用75％的酒精 消毒，然后转入碱性溶液中浸泡，最后转入培养基中进行诱导；其中所述培养基为以2/3MS 培养基为基本培养基，添加60克/升～100克/升吲哚乙酸和30克/升～50克/升6-苄氨基腺 嘌呤。

上述技术方案中，更具体的技术方案还可以是：所述碱性溶液为pH为8～10的氢氧 化钠溶液。

进一步的，采用碱性溶液浸泡的时间为1小时～2小时。

MS培养基成分为：硝酸钾1.9克/升、硝酸铵1.65克/升、磷酸二氢钾170毫克/升、硫 酸镁370毫克/升、氯化钙440毫克/升、碘化钾0.83毫克/升、硼酸6.2毫克/升、硫酸锰22.3毫 克/升、硫酸锌8.6毫克/升、钼酸钠0.25毫克/升、硫酸铜0.25毫克/升、氯化钴0.025毫克/ 升、乙二胺四乙酸二钠37.25毫克/升、硫酸亚铁27.85毫克/升、肌醇100毫克/升、甘氨酸2毫 克/升、盐酸硫胺素0.1毫克/升、盐酸吡哆醇0.5毫克/升、烟酸0.5毫克/升、蔗糖30毫克/升、 琼脂7毫克/升。

由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比具有如下有益效果：

本发明首先将消毒的怀珍珠菊腋芽转入碱性溶液中进行前处理，然后转入添加6-苄氨 基腺嘌呤和吲哚乙酸的培养基中进行诱导处理，该方法较容易诱导产生愈伤组织，提高了 怀珍珠菊的生根率和生根质量。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详述：

实施例1

本实施例怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法为：选取怀珍珠菊腋芽为外植体，先用75％的 酒精消毒，然后转入pH为8的氢氧化钠溶液中浸泡2小时，最后转入培养基中进行诱导；其中 所述培养基为以2/3MS培养基为基本培养基，添加60克/升吲哚乙酸和40克/升6-苄氨基腺 嘌呤。

实施例2

本实施例怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法为：选取怀珍珠菊腋芽为外植体，先用75％的 酒精消毒，然后转入pH为9.2的氢氧化钠溶液中浸泡1.5小时，最后转入培养基中进行诱导； 其中所述培养基为以2/3MS培养基为基本培养基，添加80克/升吲哚乙酸和50克/升6-苄氨 基腺嘌呤。

实施例3

本实施例怀珍珠菊愈伤组织的诱导方法为：选取怀珍珠菊腋芽为外植体，先用75％的 酒精消毒，然后转入pH为10的氢氧化钠溶液中浸泡1小时，最后转入培养基中进行诱导；其 中所述培养基为以2/3MS培养基为基本培养基，添加100克/升吲哚乙酸和30克/升6-苄氨基 腺嘌呤。