[发明专利]一种人参快速增殖培养基及其配制方法

说明书

技术领域

本发明属于人参组织培养技术领域，特别涉及一种人参快速增殖培养基，还涉及 一种人参快速增殖培养基的配制方法。

背景技术

人参是被子植物门双子叶植物纲离瓣花亚纲五加科，多年生草本植物，生长于密 林，多分布于黑龙江、吉林、辽宁和河北北部深山中，含有10多种人参皂甙，以及人参快醇、 多种氨基酸和维生素，是名贵的中草药材。

但是目前人参组织培养的不定芽生长缓慢，增殖时间长，增殖系数低，难以满足市 场、科研和物种保护的要求。

发明内容

基于现有技术存在上述问题，本发明提供一种人参快速增殖培养基，其以MS培养 基为基础培养基，并添加有6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、CH（水解酪 蛋白）、琼脂粉和白砂糖，本发明提供的人参快速增殖培养基具有增殖时间短，增殖系数大 的优点。

一种人参快速增殖培养基，以MS培养基为基础培养基，并添加有6-BA（6-苄氨基腺 嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、CH（水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖，水解酪蛋白含有多 种氨基酸，可提供人参不定芽生长需要，部分氨基酸还起到调节细胞分离分化的作用，促进 不定芽增殖。

6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为0.5-1.5mg/L、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）的浓 度为0.5-2mg/L、CH（水解酪蛋白）的浓度为200-500mg/L，琼脂粉的浓度为8～11g/L，蔗糖 的浓度为25～35g/L。

6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)的浓度为0.8-1.2mg/L、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）的浓 度为1-1.5mg/L、CH（水解酪蛋白）的浓度为350-450mg/L，琼脂粉的浓度为9.5～10.5g/L， 蔗糖的浓度为29～31g/L。

所述的人参快速增殖培养基的pH值为6.3~6.9。

所述的人参快速增殖培养基的pH值为6.7，接近中性的培养环境适合人参不定芽 增殖。

所述的水解酪蛋白是使用盐酸水解的酸水解酪蛋白。

一种人参快速增殖培养基的配制方法，其包括以下步骤：

步骤S10溶解配制培养基，用蒸馏水溶解MS基础培养基各成分，并添加6-BA（6-苄氨基 腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）、CH（水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖；

步骤S20高温灭菌，将步骤S10配制好的培养基放于高压灭菌锅中，于120~121℃高温灭 菌20~21分钟，冷却凝固。

所述的步骤S10还包括步骤S11调节pH值，使用HCL和KOH滴定调节培养基pH值至 6.7。

具体实施方式

实施例一：配制人参快速增殖培养基。

根据表1所示的MS培养基配方以及表2所示的人参快速增殖培养基配方，配制本发 明所述的人参快速增殖培养基。

用天平称取MS培养基中的各成分以及6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）、2,4-D（2,4-二氯苯 氧乙酸）、CH（水解酪蛋白）、琼脂粉和白砂糖，置于三角瓶中，加入适量蒸馏水，搅拌溶解，并 调节pH值至6.7，定容至1000mL。将三角瓶封口，置于高压灭菌锅中，于121℃灭菌20min，然 后置于超净工作台中自然冷却，备用。

将冷却到50-60℃时将培养基分装至组织培养瓶中，晾凉，待其凝固后将组织培养 瓶封口，备用。

表1MS培养基的成分及其用量。

表2人参快速增殖培养基的成分及其用量。

实施例二：本发明所述的人参快速增殖培养基的测试

根据表1所示的MS培养基配方以及表3所示的人参快速增殖培养基配方，参照实施例一 所述的培养基制备方法，分别配制各试验组、对照组的人参快速增殖培养基。

表3人参快速增殖培养基的成分及其用量。

在超净工作台中选取生长正常、无褐化的人参不定芽，将不定芽取出，用无菌手术 刀将不定芽切分割成单一不定芽，接种于表3所示各试验组、对照组的培养基中，然后于光 暗周期为14h光照/10h黑暗、光照强度为2300lux、温度为23±2℃的条件下进行培养。培养 35天后统计增殖人参值系数和纪录最快长出新不定芽的时间。