[发明专利]合成低聚半乳糖的专用菌株及用其合成低聚半乳糖的方法有效

专利信息
申请号: 201510600511.1 申请日: 2015-09-18
公开(公告)号: CN105219661B 公开(公告)日: 2019-01-11
发明(设计)人: 程海荣;安瑾;张乐彬;李莉娟;王犇;李云枫 申请(专利权)人: 上海交通大学;淄博珍瑭生物科技有限公司
主分类号: C12N1/16 分类号: C12N1/16;C12P19/18;C12P19/14;C12P19/00;C12R1/645
代理公司: 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 代理人: 郭国中
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 合成 半乳糖 专用 菌株 方法
【权利要求书】:

1.一种解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369,该酵母能合成β-半乳糖苷酶。

2.一种如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株在合成低聚半乳糖中的用途。

3.一种将如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

S1、将解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369菌株进行发酵培养,培养结束后菌液分离得到解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369细胞;

S2、在分离得到的细胞中加入乳糖水溶液,在40~60℃,pH4.0~8.0条件下振荡或搅拌,进行转化合成低聚半乳糖。

4.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述发酵培养可以为高密度发酵培养;该高密度发酵培养采用的培养基为含碳源、氮源、无机盐以及水的培养基,培养条件为在pH值3.0~8.0,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌。

5.如权利要求4所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述碳源为固体葡萄糖、葡萄糖母液中的一种或两种,碳源用量为10~100克/升;所述氮源为蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米浆干粉、玉米浆、磷酸氢二铵中的一种或几种的混合,氮源的用量为5~25克/升;所述无机盐为硫酸镁、氯化锰、氯化铜中的一种或几种,无机盐用量为0~2.5克/升。

6.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述发酵培养为高浓度碳源的发酵培养;该高浓度碳源的发酵培养采用的培养基为含高浓度碳源、氮源、无机盐以及水的培养基,培养条件为在pH值3~8,温度25~35℃条件下振荡或者搅拌。

7.如权利要求6所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述高浓度碳源为固体葡萄糖、葡萄糖浆、葡萄糖母液中的一种或多种,折合葡萄糖含量为200~300克/升;所述氮源为蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米浆干粉、玉米浆、磷酸氢二铵中的一种或几种的混合,氮源的用量为5~25克/升;所述无机盐为硫酸镁、氯化锰、氯化铜中的一种或几种,无机盐用量为0~2.5克/升。

8.如权利要求6所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,采用高浓度碳源的发酵培养时,菌液分离得到的上清液为含有赤藓糖醇的溶液,用于纯化分离赤藓糖醇,沉淀为解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369细胞。

9.如权利要求6所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,采用高浓度碳源的发酵培养时,步骤S2中可选择加入葡萄糖氧化酶以及过氧化氢酶进行转化合成低聚半乳糖。

10.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述步骤S2后还包括当转化液中低聚半乳糖的含量不再增加时停止转化,进行纯化精制,得到液体或者粉状低聚半乳糖的步骤。

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