[发明专利]用于修复尿道损伤的生物修复材料及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了用于修复尿道损伤的生物修复材料及其制备方法与应用。本发明所提供的生物修复材料，为用胶原结合血管内皮生长因子修饰胶原支架材料得到的生物材料；胶原结合血管内皮生长因子为氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质；胶原支架材料按照如下胶原支架材料的制备方法制备：1)用2‑5mol/L氢氧化钠水溶液处理动物体表皮肤，得到氢氧化钠处理的材料；2)用去污剂处理所述氢氧化钠处理的材料，得到去污剂处理的材料；3)除去所述去污剂处理的材料中的杂质，得到所述胶原支架材料。实验证明，本发明的生物修复材料可以用来修复尿道损伤。

技术领域

本发明涉及生物医学领域中用于修复尿道损伤的生物修复材料及其制备方法与应用。

背景技术

尿道损伤是一种常见的泌尿系统疾病，通常分为尿道内损伤和外损伤。尿道内损伤绝大多数是在应用经尿道器械操作或排出异物(如结石)时发生，少数由于异物插入尿道而引起；尿道误注某些化学药物如硝酸银、硫酸铜、石炭酸等可引起化学灼伤。经尿道行电切除术时可致尿道电灼伤。尿道外暴力损伤较多见，可为贯通伤或闭合伤。前者主要见于战场，尿道被火器或利器所穿破。受伤部位大多在球、膜部。海绵体部和前列腺部则少见。闭合性尿道损伤，在战时和平时均可见到。会阴部骑跨伤或踢伤时受损部位多见于球部尿道，而伴骨盆骨折，时常伴膜部尿道损伤。

严重的尿道损伤往往需要重建手术来恢复其结构和功能。由于缺乏适当的重建材料，目前在临床上进行尿道重建始终非常困难，尤其是大面积损伤尿道的重建在临床治疗上仍面临挑战，目前阴茎皮肤和粘膜是最常用的尿道重建替代物，不仅造成病人二次损伤，而且自体组织替代物随着时间推移常常会萎缩，造成尿道再狭窄及其他一些并发症。据统计，治疗五年内的并发症发生率超过21％，包括尿道再狭窄、尿道瘘、感染、勃起功能障碍等。而且如果尿道损伤长度超过4厘米，自体组织移植的尿道成形术往往不能成功。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何修复损伤尿道。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了能修复尿道损伤的生物修复材料。

本发明所提供的生物修复材料，为用胶原结合血管内皮生长因子(CBD-VEGF)修饰胶原支架材料得到的生物材料；

所述胶原结合血管内皮生长因子为下述A1)或A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的第1-184位氨基酸所示的蛋白质；

A2)在SEQ ID No.1的第1-184位氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)衍生的蛋白质；

A3)在A1)或A2)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。

其中，SEQ ID No.1由192个氨基酸组成，SEQ ID No.1的第1-166位氨基酸为血管内皮生长因子的序列；SEQ ID No.1的第178-184位氨基酸为胶原结合域的序列；SEQ IDNo.1的第187-192位氨基酸为His标签的序列。

上述A2)中的蛋白质可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述A2)中的蛋白质的编码基因可通过将序列表中SEQ ID No.2的第1-184位核苷酸所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变得到。上述A3)中的蛋白质可在SEQ ID No.2的第1-184位核苷酸所示的DNA序列的5′端和/或3′端连上标签的编码序列得到。所述标签可为His标签。

其中，SEQ ID No.2由576个核苷酸组成。SEQ ID No.2的第1-498位核苷酸编码SEQID No.1的第1-166位氨基酸所示的血管内皮生长因子。

上述生物修复材料中，所述胶原支架材料可由如下方法制备：