[发明专利]聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)制备壳聚糖-聚乙二醇水凝胶；

(2)制备包埋碱性成纤维因子bFGF的聚乳酸-羟基乙酸共聚物PLGA微球；

(3)制备静电纺丝液；

(4)电纺丝法制备聚丙烯网片/静电纺丝纳米纤维膜；

其中，所述的壳聚糖-聚乙二醇水凝胶制备方法如下：

1)聚乙二醇PEG于20-28℃氮气环境下溶解在二氯甲烷中，溶液中PEG终浓度为8-12g/100mL；

2)将4-二甲氨基吡啶与三乙胺溶解在的二氯甲烷中得混合溶液A，使混合溶液A中4-二甲氨基吡啶和三乙胺浓度均为0.35-0.4mol/L，然后将混合溶液A加入到上一步制备的含PEG的二氯甲烷溶液中搅拌10-15min得混合溶液B，所述的混合溶液A与含PEG的二氯甲烷溶液的体积比是1:3-8；

3)将混合溶液B逐滴加入到含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中，在室温氮气环境下反应20-24h；其中，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液中p-氨甲酸苯酯的浓度为0.1-0.5mol/L，所述的含p-氨甲酸苯酯的二氯甲烷溶液与步骤2)中所述的含PEG的二氯甲烷溶液的体积比是1:1-2；

4)将步骤3)所得溶液在冷乙醚中蒸干沉淀析出，将沉淀过滤然后在真空中干燥，最终获得PNC-PEG-PNC；

5)将PNC-PEG-PNC在室温氮气环境下溶解在二甲亚砜中使其终浓度为5-10g/100mL；

6)取酪胺溶解在二甲亚砜中，得到浓度为3-5mol/L的酪胺二甲亚砜溶液，然后将酪胺二甲亚砜溶液逐滴加入到上一步制备的PNC-PEG-PNC溶液中，在氮气环境下反应5-7h，形成PNC–PEG–TA溶液；其中，酪胺二甲亚砜溶液与PNC-PEG-PNC溶液的体积比为1:1-2；

7)壳聚糖用pH5的盐酸溶液然后加入到二甲亚砜中形成壳聚糖浓度为0.5-0.7g/100mL的溶液，然后将上述PNC-PEG-TA溶液加入到该溶液中在室温氮气环境下搅拌24h混合反应；其中，壳聚糖溶液与上一步酪胺二甲亚砜溶液的体积比为10-15:1；

8)将步骤7)所得溶液用氧化铝垫过滤，去除PNC盐，然后用0.01M，pH7.4的PBS溶液透析三天再用蒸馏水透析2天，来截留分子量为12–14kDa的材料；

9)将透析液冻干，获得Chitosan-PEG-TA冻干粉末，其中Chitosan-PEG-TA浓度为7-10wt％；

10)将Chitosan-PEG-TA冻干粉末溶解在含HRP 0.002–0.063mg/mL和H₂O₂ 0.04-0.08wt.％的0.01M，pH7.4的PBS溶液中得到壳聚糖-聚乙二醇水凝胶。