[发明专利]降低邻苯二甲醛荧光法测铵氮的试剂空白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及铵氮测定，具体是邻苯二甲醛荧光法测铵氮，更具体是降低邻苯二甲醛荧光法测铵氮的试剂空白的方法。

背景技术

铵氮是水体中浮游植物可直接利用的无机氮形态 [Harrison, W.G., Harris, L.R., Irwin, B.D., 1996. The kinetics of nitrogen utilization in the oceanic mixed layer: Nitrate and ammonium interactions at nanomolar concentrations. Limnology and Oceanography41, 16-32.]。水体中铵氮以游离氨（NH₃）或铵根离子（NH₄⁺）的形式存在。铵氮是指游离氨和铵根离子的总称。在内陆水体和近岸海域，水体中铵氮含量较高，甚至可导致水体富营养化[Painting, S.J., Devlin, M.J., Malcolm, S.J., et al, 2007. Assessing the impact of nutrient enrichment in estuaries: Susceptibility to eutrophication. Marine Pollution Bulletin 5, 74-90]。然而，在一些大洋表层海水中，铵氮含量通常低于1 μmol/L，甚至低至nmol/L级别[Johnson, M.T., Liss, P.S., Bell, T.G., et al, 2008. Field observations of the ocean-atmosphere exchange of ammonia: Fundamental importance of temperature as revealed by a comparison of high and low latitudes. Global Biogeochemical Cycles 22, 1-15]。测定海水中低浓度的铵氮浓度，目前广泛采用的方法为邻苯二甲醛(o-phthaldialdehyde，简称OPA)荧光法，该法基于的原理为：在碱性介质中， 亚硫酸钠存在下，OPA与铵氮发生荧光反应，生成具有荧光强度的异吲哚化合物。采用该法测定实际水样时，有时会加入EDTA络合剂掩蔽金属离子。该法具有选择性好、灵敏度高等优点，但由于受方法空白的影响，检测限仍然无法满足nmol/L级别海水的测定要求。

发明内容

为了克服邻苯二甲醛荧光法受方法空白的影响，降低检测限，本发明提供一种降低邻苯二甲醛荧光法测铵氮的试剂空白的方法。

方法空白的可能来源有仪器、试剂、实验室空气环境等，其中，试剂是方法空白的最主要来源。因此，本发明为降低方法的空白，提出降低邻苯二甲醛荧光法测铵氮的试剂空白，通过这样的方法来降低该法检测限。

本发明的降低邻苯二甲醛荧光法测铵氮的试剂空白的方法，包括：

1）采用煮沸法去除碱性介质溶液和络合剂-碱性介质缓冲溶液中的铵氮；

2）采用HLB小柱固相萃取法去除邻苯二甲醛或其衍生物和Na₂SO₃的混合溶液中的铵氮。

进一步，所述1）的具体过程为：取待处理液加至事先放有沸石的三角烧瓶中，然后加入70%量待处理液的超纯水，加热煮沸，至溶液最终体积为待处理液原体积时，停止加热，用冰浴冷却溶液至常温，倒入洁净的试剂瓶中，盖紧、密封保存。 

较佳地，密封保存采用双层聚乙烯塑料袋密封保存。 

上述方法中，为了方便计量，溶液最终体积采取称量的方法确定，其中，溶液密度视为1.0 g/mL。

所述2）的具体过程为：混合溶液室温放置8小时以上，使混合溶液以每分钟不超过60滴的速度通过HLB小柱固相萃取装置中的HLB小柱流至棕色玻璃瓶中，于棕色玻璃瓶中密封冷藏。

HLB小柱固相萃取装置中的小柱选自：Oasis HLB小柱或C18填料小柱。

本发明涉及的碱性介质为：NaOH；络合剂包括：EDTA及其盐、柠檬酸及其盐；邻苯二甲醛衍生物包括：4，5-二甲氧基邻苯二甲醛、4-甲氧基邻苯二甲醛。