[发明专利]一种富集微污染水体中硝酸盐含量的生物制剂合成

权利要求书

1.一种富集微污染水体中硝酸盐含量的生物制剂合成，其特征在于具体制备过程为：

（1）取5～8g鱼腥草、10～12g地瓜藤、5～8g葛藤在韦氏搅切器中粉碎，加入10～15mL无水乙醇，过层析柱，用碳酸钙颗粒为固定相，丙酮为流动相进行分离，提取出叶绿素a和细菌叶绿素混合物；

（2）将上述混合物置于50mL具塞比色管中，在60~80°C恒温水浴中放置1.5h，加入1～2g蛋白质、0.5～1g果胶，混合均匀，转移至100mL容量瓶中，用乙醚定容，再用0.05~0.10um滤膜过滤除菌；

（3）将1.0~1.5g 磷酸二氢钠、0.5~ 1.0g氯化镁溶解于10mL去离子水中，搅拌，待完全溶解后高温高压灭菌30min，冷却60~80°C，再加入滤膜除菌后的叶绿素a和细菌叶绿素混合液中；

（4）待溶液冷却至室温时，加入10~15mL琥珀酸，调节pH=4.6~6.0；

（5）在上述混合液中加入5~10mL甲醇、5~8mL乙酸乙酯，搅拌，维持温度在60~80°C，并以无菌操作加入10ug/L 谷氨酸7~9mL ，在100°C下灭菌20~25min，补充蒸发的水分，调整pH=.4.6~6.0后，灭菌20~25min后，冷却，静置，至烧杯内溶液分层，经无菌过滤得到上层无色清液；

（6）在上述清液中加入硫代硫酸钠0.1~0.15g，0.5mol/L 氯化镁溶液1~1.5mL，调节pH=7.2~7.8，于110°C灭菌20~25min，冷却至室温，混合后倒入灭菌试管中，在-3~-10°C下避光保存，备用。