[发明专利]一种优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地涉及一种优化的β-甘露聚糖酶基因MAN及其毕赤酵母表达载体。

背景技术

在豆类、谷类及其副产品中普遍存在着一种抗营养因子---β-甘露聚糖，它具有极强的吸水性，在单胃动物消化道内易形成凝胶状，影响营养物质与消化液的接触，降低了饲料利用率。而β-甘露聚糖酶是一类能够特异性降解β-甘露聚糖的水解酶，属于半纤维素酶类。水解的底物有半乳甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳葡萄甘露聚糖和甘露聚糖，产物有少量的单糖和2-10个单糖分子构成的寡糖。能有效降低消化道内容物黏度；而且，其分解β-甘露聚糖产生的甘露低聚糖，能作为双歧杆菌的增殖因子、促进肠道内有益菌群的增殖，提高动物的生产性能。β-甘露聚糖酶一方面可以提高饲料消化利用率，扩大饲料原料来源，缓解饲用原料短缺的局面；另一方面可减少养殖的粪便排出量及替代部分抗生素，从而减少对环境的污染及避免药物残留。

β-甘露聚糖酶是一种广谱诱导型多功能酶，国内外现主要用于造纸工业纸浆的漂白、油井的破胶、降解植物胶生产低聚糖用作双歧杆菌促生长因子，防病抗衰老的保健食品以及饲料工业中作为抗营养因子。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种优化的β-甘露聚糖酶基因，优化后的序列GC含量由原来的0.56减少到0.54；CAI值有原来的0.68提高到0.81。

本发明的另一目的是提供有优化的β-甘露聚糖酶基因的重组毕赤酵母表达载体。

本发明的另一目的是提供有优化的β-甘露聚糖酶基因的重组菌株。

本发明对核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-甘露聚糖酶基因进行优化。

SEQ ID NO.1：

1  CTGCCGAAAGCATCCCCTGCACCGAGCACCAGCAGCAGTGCTGCCTCCACCTCCTTCGCT

61   AGCACCTCCGGCCTCCAATTCACCATTGATGGCGAAACTGGCTACTTCGCCGGAACGAAC

121  AGCTACTGGATCGGTTTCCTCACTGACAACGCGGACGTCGACCTCGTCATGGGCCACCTG

181  AAGTCGTCCGGCCTCAAGATCCTCCGCGTGTGGGGCTTCAACGATGTCACCTCGCAGCCC

241  TCCTCCGGCACAGTTTGGTACCAACTGCACCAGGACGGCAAATCGACAATCAACACGGGT

301  GCCGACGGTCTCCAGCGCCTCGACTACGTCGTCTCGTCTGCCGAACAGCACGACATCAAA

361  CTCATCATCAACTTCGTCAACTACTGGACCGATTACGGTGGTATGTCTGCGTACGTGAGC

421  GCGTATGGCGGATCCGGCGAGACGGATTTCTATACCAGTGATACCATGCAGAGTGCCTAT

481  CAGACATATATCAAGACGGTCGTGGAGCGGTACAGTAACTCCTCGGCGGTGTTTGCGTGG

541  GAGTTGGCGAATGAGCCGAGATGTCCGAGTTGCGATACTTCTGTGTTGTATAACTGGATT

601  GAGAAGACGAGTAAGTTTATTAAGGGGTTGGATGCGGATCGTATGGTTTGTATTGGTGAT

661  GAGGGCTTCGGTCTCAACATCGACTCGGACGGCAGCTACCCTTATCAATTCTCCGAGGGC

721  TTGAACTTTACGATGAACCTCGGTATCGATACTATTGACTTTGGTACCCTCCACTTGTAC

781  CCTGATAGCTGGGGCACCTCCGACGACTGGGGCAACGGCTGGATCACCGCCCACGGCGCA

841  GCCTGCAAAGCGGCCGGCAAGCCATGTCTCCTGGAGGAATACGGAGTCACCTCGAACCAC

901  TGCAGTGTGGAGGGCTCGTGGCAGAAGACAGCGCTCAGCACAACGGGCGTCGGCGCGGAT