[发明专利]一种血清自身抗体检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于抗体检测领域，具体地说，是关于一种新的血清自身抗体检测试剂盒。

背景技术

根据中国肿瘤登记中心发布的《2012中国肿瘤登记年报》，每年新发肿瘤病例约为312万例，平均每天8550人，每分钟就有6人确诊为癌症。居全国恶性肿瘤发病第一位的是肺癌，其次为胃癌、结直肠癌、肝癌和食管癌，前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤的76.39%。居全国恶性肿瘤死亡第一位的仍是肺癌，其次为肝癌、胃癌、食管癌和结直肠癌，前10位恶性肿瘤占全部恶性肿瘤的84.27%。同时，癌种也呈现地域化特点，食管癌高发区主要集中河南、河北等中原地区；胃癌高发区主要集中在西北及沿海各省，如上海、江苏、甘肃、青海等较为突出；肝癌高发区集中在东南沿海及东北吉林等地区。肺癌在所有的肿瘤死亡率中高居首位。世界卫生组织在2001年曾经发布警告说，在过去的10年中，全球肺癌的发病率每年以22％的速度在飞快上升，每年全球新增肺癌患者达120万人，死亡110万人。据北京市卫生局提供的统计数据显示，2010年肺癌位居北京市户籍人口男性恶性肿瘤发病的第一位，在女性中居第二位，仅次于乳腺癌。2001至2010年，北京市肺癌发病率增长了56%。全市新诊断出的癌症中有五分之一为肺癌。据流行病学专家预测，如果不控制吸烟和空气污染，到2025年，我国每年肺癌患者将超过100万，成为世界第一肺癌大国。肺癌的预后与其发展阶段紧密相关，局限性肺癌五年存活率为53%，而在出现转移的情况下五年存活率仅为4%。肺癌的早期发现和及时防治能显著提高患者的存活率和生活质量。

肿瘤早期筛查的目的在于准确地诊断出在显著症状出现之前的、尚处于发展早期的癌症。各种癌症都有各自适合的检测方法，但都存在相应的优缺点，检测中一个尤其普遍的问题是很难在癌症发生的早期检测到肿瘤的存在，而且检测结果的特异性不高从而导致过度诊断的问题。以肺癌为例，随着医学影像学的发展，低剂量螺旋CT被广泛用于检测肺部早期结节。但是低剂量螺旋CT的问题在于其检测结果的假阳性，CT不能区分肿瘤和其他的阴影比如肺部组织瘢痕化或良性肿块。这样的检测方法不仅不能有效地降低肺癌患者的死亡率，多次CT检测还有可能加速肺癌的恶化。其他的检查方法包括正电子发射断层扫描、经皮细针支气管针吸活检和经支气管壁针吸活检、痰细胞病理学检查以及支气管内镜检查，则存在各方面的、如价格昂贵、无法早期筛查、有创伤、或可靠性差的问题。因此，真正的非介入性诊断方法成为医生和患者共同期待的、用于及早确认肺癌的辅助手段。

20世纪初，Paul Ehrlich在动物个体之间进行肿瘤移植的研究，发现移植瘤能在被移植动物体内萎缩消除，第一次提出了肿瘤抗原和肿瘤免疫的概念。1966年，Baldwin首次证实了机体免疫系统对自发肿瘤的鉴别和排斥反应，从而奠定了肿瘤抗原研究的理论基础。20世纪70年代初免疫监控的概念被正式提出，该理论认为在肿瘤发生的早期，机体的免疫系统可以及时识别癌细胞，并抑制癌细胞的生长甚至清除癌细胞，为癌症的早期检测和治疗提供了新的思路。癌症的抗原检测用于辅助诊断的方法被大量采用，但是抗原检测的一个问题是，其在血清中含量非常低，到其浓度增加到利用现有技术即可检测出来的水平时，癌症已经发展到晚期了。因此，要达到早期准确检测肿瘤相关抗原的目的，必须显著提高检测的灵敏度。利用机体免疫应答反应的特点，极低浓度的抗原即可激发放大的免疫反应从而产生相应的抗体，而且由于B细胞的记忆功能，免疫反应可以持续存在。因此有一个切实可行的、采用检测血清自身抗体滴度来推断机体对相应肿瘤相关抗原的免疫反应。

关于自身抗体产生的机理还不是很清楚。近年来癌症领域的研究进一步证实，在正常情况下正常细胞表达的野生型蛋白质不会导致机体的免疫应答。癌症研究领域一个广泛接受的观点是，在肿瘤发展的早期肿瘤细胞产生基因突变、异位或重组，相关的抗原释放后被免疫系统识别为“异体蛋白”而发生免疫应答反应，因而产生针对该抗原的抗体，即肿瘤自身抗体。自身抗体以游离的形式或与相关抗原结合成抗原抗体复合物的形式存在于体内循环中。由于免疫系统的敏感性和稳定性，且体液免疫反应具有放大作用，癌症自身抗体可以比影像学诊断出癌细胞前5年在血液中被检测出。与血清中的其他多肽和蛋白质不同，抗体可以非常稳定地存在而不易被降解。加上人体免疫系统的记忆功能，肺癌自身抗体可以在体内长期存在，其浓度不随肿瘤的发展而变化。多篇中外文献研究表明，在多种肿瘤包括肺癌患者的血清中均可检测到肿瘤相关抗原的自身抗体的存在。对肿瘤早期抗原和抗体的免疫检测正逐渐成为诊断领域的一个研究热点。