[发明专利]除草剂耐受性棉花事件pDAB4468.19.10.3

说明书

棉花事件pDAB4468.19.10.3包括编码AAD‑12和PAT的基因，为含有该事件的棉花作物提供了除草剂耐受性，并实现了用于作物保护的方法。

优先权声明

本专利申请要求获得于2012年1月23日提交的美国临时专利申请系列No.61/589,594的权益。

背景

当在转基因植物中表达时，编码AAD-12(芳氧基链烷酸(aryloxyalkanoate)双加氧酶-12)的基因能够赋予针对苯氧基乙酸类除草剂，2,4-D和MCPA，和吡啶基氧基乙酸类除草剂，绿草定和氟草烟，的产业水平的耐受性。当在转基因植物中表达时，编码PAT(膦丝菌素乙酰转移酶(phosphinothricin acetyltransferase))的基因能够引入针对膦丝菌素除草剂(草胺膦)的耐受性。PAT已经成功地在棉花中表达，同时用作生产转基因作物的可筛选标记并在转基因植物中引入针对除草剂草胺膦的商业水平的耐受性。

已知转基因在植物中的表达受到其在植物基因中定位的影响，这可能是由于染色质的结构(例如异染色质)或者转录调节元件(例如增强子)靠近整合位点(Weising etal.,Ann.Rev.Genet.22:421-477,1988)。与此同时，转基因在基因组中的不同位点的存在会以不同的方式影响植物的整体表型。由于这个原因，经常需要筛选大量的转基因事件，以便鉴定以所导入的感兴趣的基因的最佳表达为特征的特定转基因事件。例如，已经在植物和其它生物中观察到，导入基因的表达水平在不同事件中可能有很大的变化。也可能存在空间或时间表达模式的差异，例如，转基因在各种植物组织中的相对表达的差异，这可能不符合根据存在于所导入基因构建体中的转录调控元件所预期的模式。由于这个原因，通常产生数百至数千个不同的事件并对这些事件进行筛选，以便获得具有为产业目的所期望的转基因表达水平和模式的单一事件。具有期望的转基因表达水平或模式的事件可用于使用传统的育种方法通过有性异交(outcrossing)将转基因渐渗(introgressing)到其它遗传背景中。这种杂交的后代保持原有转化子的转基因表达特征。这一策略被用于在若干已经良好适应局部生长条件的品种中确保可靠的基因表达。

理想的是，能够检测特定事件的存在，以便确定有性杂交的后代中是否含有感兴趣的转基因或感兴趣的转基因群。此外，用于检测特定事件的方法将有助于遵从，例如，要求上市前审批(pre-market approval)和对从重组作物衍生的食品或纤维进行标注的法规，或者有助于进行环境监测，监测田间作物的性状，或者监测从作物的收获品衍生的产品，以及用于确保相关方遵从有关法规或合同条款。

有可能通过任何本领域已知的核酸检测方法来检测转基因事件的存在，包括但不仅限于，聚合酶链式反应(PCR)或使用核酸探针的DNA杂交。这些检测方法一般聚焦于频繁使用的遗传元件，例如启动子、终止子、标志物基因等，因为对于许多DNA构建体，编码区是可以互换的。其结果是，这些方法并不能用于区分不同的事件，特别是那些使用相同的DNA构建体或非常相似的构建体产生的事件，除非邻近所插入异源DNA的侧翼DNA的DNA序列是已知的。例如，美国专利申请2006/0070139中描述了一种关于玉米事件DAS-59122-7的事件特异性PCR测定法。建立一种用于鉴定棉花事件pDAB4468.19.10.3的简单而有判别力的方法是令人期待的。

公开