[发明专利]中药苦黄注射液及其原料药材、半成品的指纹图谱检测方法及应用

权利要求书

1.中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）供试品溶液制备：取苦黄注射液作为供试品溶液；

（2）高效液相色谱法测定苦黄注射液的对照指纹图谱：取10批以上苦黄注射液样品在适当的色谱条件下进样，测得各批次苦黄注射液的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用相似度软件计算获得共有模式作为对照指纹图谱；

（3）高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：将待测苦黄注射液供试品溶液按步骤（2）相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；

（4）将步骤（3）得到的供试品溶液指纹图谱和步骤（2）得到的对照指纹图谱用相似度软件评价。

2.根据权利要求1所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为1：100的HAc：H₂O为流动相A相，体积比为1：100的HAc：CH₃OH为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温35～40℃，检测波长为250～260nm。

3.根据权利要求2所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中色谱条件为：以规格为5μm，4.6×250mm的DianmonsilC18为测定用色谱柱，体积比为1：100的HAc：H₂O为流动相A相，体积比为1：100的HAc：CH₃OH为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温40℃，检测波长为254nm。

4.根据权利要求3所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述的线性梯度洗脱方式为：0分钟时流动相A:B的体积比例为85:15，25分钟时流动相A:B的体积比例为33：67，65分钟时流动相A:B的体积比例为0：100。

5.根据权利要求1所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，体积比为0.5:100的HAc：H₂O为流动相A相，体积比为0.5:20:80的HAc:H₂O:CH₃CN为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温30～35℃，检测波长为260～270nm。

6.根据权利要求5所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中色谱条件为：以规格为5μm，4.6×250mm的DianmonsilC18为测定用色谱柱，体积比为0.5:100的Hac：H₂O为流动相A相，体积比为0.5:20:80的HAc:H₂O:CH₃CN为流动相B相，线性梯度洗脱，柱温30℃，检测波长为262nm。

7.根据权利要求6所述的中药苦黄注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于，所述的线性梯度洗脱方式为：0分钟时流动相A:B的体积比例为98:2，20分钟时流动相A:B的体积比例为84：16，30分钟时流动相A:B的体积比例为80：20，90分钟时流动相A:B的体积比例为40：60，100分钟时流动相A:B的体积比例为0：100。

8.中药苦黄注射液原料药材的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）供试品溶液制备：取苦黄注射液原料药材，经处理后得到原料药材的供试品溶液；

（2）高效液相色谱法测定原料的对照指纹图谱：分别取苦黄注射液原料药材各10批以上，按步骤（1）的处理方法制得供试品溶液，在适当的色谱条件下测得每批原料药材的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用相似度软件计算获得共有模式作为原料药材对照指纹图谱；

（3）高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱：取步骤（1）的供试品溶液按步骤（2）相同的色谱条件进样，测得苦黄注射液原料药材的供试品溶液的指纹图谱；

（4）将步骤（3）得到的供试品溶液指纹图谱和步骤（2）得到的对照指纹图谱用相似度软件评价。

9.根据权利要求8所述的中药苦黄注射液原料药材的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(1)所述的原料药材处理方法为：将药材粉碎，取药材粉末4.0g，精密称定，加水100ml，加热回流1～2小时，过滤，取续滤液50ml浓缩至约10ml，加乙醇使含醇量达85％，放置过夜，过滤，滤液浓缩并用水定容至10ml。