[发明专利]一种用于低温堆肥的复合菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于低温堆肥的复合菌剂及其制备方法和应用，属于微生物制剂领域。

背景技术

我国农业废弃物的种类繁多，其中，畜禽粪便年产生量约为18.6×10⁸t，其中牛粪10.7×10⁸t，猪粪2.7×10⁸t，羊粪3.4×10⁸t，家禽粪1.8×10⁸t，并且随着工农业生产的迅速发展和人口数量的激增，这些废弃物以年5%～10%的速度递增。堆肥技术作为一种保持良好环境效应的产物,具有生物处理的可持续性和废弃资源的循环利用等特征,已被许多国家和地区所接受,成为处理有机固体废物的有效方法之一。

微生物在堆肥过程中是作为一种添加剂加入的，即微生物接种剂。市售普通的微生物接种剂通常为中温菌剂或高温菌剂。但是在低温环境下，这些微生物接种剂在堆肥过程中的作用大大折扣，导致升温阶段时间长，影响了堆肥无害化进程和发酵周期。因此，筛选出能有效缩短升温时间的复合微生物接种菌系对于华北地区冬季低温堆肥具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于低温堆肥前期帮助快速升温的复合菌剂。

为了实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案。

一种用于低温堆肥的复合菌剂，由下述菌株组成：

假单胞菌属B6-15     1.0×10¹⁰～1.0×10¹²cfu/mL；

假单胞菌属B5-16     1.0×10¹⁰～1.0×10¹²cfu/mL；

总菌数为2.0×10¹⁰-2.0×10¹²cfu/mL。

作为本发明的优选实施方式，所述用于低温堆肥的复合菌剂，由下述菌株组成：

假单胞菌属B6-15        2.6×10¹⁰～20.0×10¹⁰cfu/mL；

假单胞菌属B5-16        1.8×10¹⁰～15.0×10¹⁰cfu/mL。

本发明所述假单胞菌属B6-15(Pseudomonas sp.)、假单胞菌属B5-16（Pseudomonas sp.）均可以通过北京沃土天地生物科技有限公司购买得到。

本发明还提供上述复合菌剂的制备方法，包括如下步骤：

1）斜面培养：将B6-15，B5-16原始菌种无菌条件下分别接种于固体培养基上，在15-25℃条件下培养1-2天，活化菌株；

2）一级种子培养：将步骤1)活化的菌种无菌条件下分别接种于NR液体培养基，15-25℃摇床培养1-2天，制得一级种子液；

3）混合发酵培养：将步骤2）一级种子液B6-15、B5-16接种到发酵罐中，20℃条件下混合培养3-5天，得到复合菌剂。

其中，在步骤1）中，所述固体培养基配方为：蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，NaCl5g/L，琼脂15g/L，去离子水1000ml，灭菌。

在步骤2）中，所述NR液体培养基配方为：蛋白胨10g/L，牛肉膏5g/L，NaCl5g/L，去离子水1000ml，灭菌。

在步骤2）中，所述摇床培养条件为：通气量1：1-1.2，150-200r/min。

在步骤3）中，所述发酵培养基配方为：糖蜜15％，玉米浆2％，MgSO₄0.05％，K₂HPO₄0.15％，NaCl0.1％，葡萄糖1.5％。

在步骤3）中，所述接种量为发酵培养基体积的1-10%。

本发明还提供复合菌剂在低温堆肥中的应用。具体为将复合菌剂以堆肥材料干重的3-6‰接入堆肥材料中，2-4℃进行堆肥15-48h。

本发明所述的复合微生物菌剂具有低温条件下生长速度快，共生、协同促进且不产生拮抗作用的特点，培养20h即达到稳定期，OD₆₀₀=2.9；在传代过程中菌株数量稳定性保持在较高水平，生长pH较稳定，介于7.5-8之间。

在低温条件下，使用本发明所述的复合菌剂，可以在堆肥升温过程中起到阶段性作用，显著缩短堆肥升温阶段所需时间，对于解决国内北方地区冬季低温环境条件下堆肥升温困难的现状具有一定现实意义。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。