[发明专利]一种采用高渗透压收获液收获病毒的方法有效
申请号: | 201310363215.5 | 申请日: | 2013-08-16 |
公开(公告)号: | CN103614346A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 张嵬;于巍;姜德玉;何玉君;康乐;杨利伟;黄金凤;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 科兴(大连)疫苗技术有限公司 |
主分类号: | C12N7/02 | 分类号: | C12N7/02;A61K39/25;A61K39/15;A61K39/125;A61K39/29;A61P31/14;A61P31/22;C12R1/93 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 116620 辽宁省大*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 采用 渗透压 收获 病毒 方法 | ||
1.一种用于破碎细胞收获病毒的高渗透压收获液,其特征在于,该高渗透压收获液的渗透压为1500~2500mOsmol/kg。
2.根据权利要求1所述的高渗透压收获液,其特征在于,含有缓冲液PBS和蔗糖。
3.根据权利要求2所述的高渗透压收获液,其特征在于,蔗糖含量为40%-60%,所述%为蔗糖与缓冲液PBS的质量体积比,单位为g/ml。
4.根据权利要求2所述的高渗透压收获液,其特征在于,所述缓冲液PBS的配方为:0.876%氯化钠,0.031%二水合磷酸二氢盐和0.287%十二水合磷酸氢二盐,所述%为质量体积比,单位为g/ml。
5.根据权利要求2所述的高渗透压收获液,其特征在于,通过以下方法配制得到,将蔗糖按照40%-60%的质量体积比加入PBS缓冲液中,至完全溶解,过滤除菌。
6.权利要求1-5任一所述的高渗透压收获液在制备病毒类疫苗或药物中的应用。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述的病毒为水痘病毒、轮状病毒、EV71病毒、CA16病毒或甲型肝炎病毒。
8.一种采用高渗透压收获液收获病毒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)培养病毒;
(2)配制权利要求1-5所述的高渗透压收获液;
(3)当细胞出现病变并且CPE程度大于50%时,弃细胞培养液后加入高渗透压收获液,室温静置5-30分钟;
(4)显微镜下观察细胞状态,待细胞发生明显收缩时震摇,使细胞脱壁,收集病毒液;
(5)向收获的病毒液中加注射水,使细胞渗透压恢复至等渗。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(1)采用细胞瓶或细胞工厂培养病毒。
10.权利要求8-9任一项所述的方法在制备用于预防或治疗水痘病毒、轮状病毒、EV71病毒、CA16病毒或甲肝病毒所致疾病的疫苗或药物中的应用。
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