[发明专利]一种疫苗的冻干保护剂

说明书

技术领域

本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种疫苗的冻干保护剂。

背景技术

目前，弱毒活疫苗是预防畜禽传染病的主要疫苗之一，在我国动物疫苗中，活疫苗占相当大的比例，但国内疫苗企业常用的冻干保护剂组方简单，保护性能差，如果在2～8℃条件下保存，保存期只有短短的3～6个月，大多需要在-15℃条件下保存。而低温保存的需求使疫苗的长期保存和长途运输受到很大限制，加上基层防疫部门和用户缺乏必要的冷冻和冷藏设施，很容易因疫苗保存温度不当而使其效价大打折扣，最终导致免疫失败。。本发明提供的冻干保护剂冻干的疫苗，可在2～8℃条件下长期保存，保存期可长达24个月，病毒含量均高于《中华人民共和国兽药典》规定的标准，解决了兽医生物制品长久以来一直存在的疫苗因储存、运输、使用过程中温度升高而造成的效价损失问题，也解决了生物制品的储存和运输所必需的低温环境带来的高成本问题。 

发明内容

本发明的目的是提供一种疫苗的冻干保护剂及其制备方法，即一种可以在2～8℃条件下长期保存仍能保持疫苗效价的冻干型家畜用疫苗的冻干保护剂配方及制备方法。

本发明的冻干保护剂，是由如下质量体积百分比浓度的物质组成的： 2.4～4% NZ-胺、0.3～0.5%谷氨酸单钾盐、20～25%蔗糖、1.5～2.5%水解乳蛋白、4～6%水解明胶；余量为水。

上述的冻干保护剂还加入了青霉素和链霉素，其终浓度分别为青霉素100IU/ml，链霉素80μg/ml。

本发明的冻干冻干保护剂，其制备方法如下：

1）首先称取NZ-胺、谷氨酸单钾盐、蔗糖和水解乳蛋白，溶解后过滤除菌制成过滤液；

2）称取水解明胶加入到沸水中，搅拌至完全溶解，高压灭菌制成明胶溶液；

3）将步骤1）制备的过滤液和步骤2）的明胶溶液混合后，制成冻干保护剂。

其中步骤1）的过滤除菌是用0.22μm滤膜过滤除菌。

本发明的冻干保护剂采用的原料成本低，操作简单，可以大规模生产，疫苗在2～8℃条件下保存24个月后，疫苗效价均≥10^5.7TCID₅₀/头份（国标），从而有效的延长了疫苗的保存期限。

具体实施方式

在疫苗的冻干保护剂制备领域中，保护剂组分的选择及配比对疫苗的保存效果具有重要的影响。申请人对本发明冻干保护剂的组分进行了长期的研究，并优化了彼此间的配比浓度，从而使各组分之间具有最大的复配效果。

对于本发明冻干保护剂所使用的组分描述如下：

1、NZ胺（NZ amine casein hydrolysate），又称为酪蛋白的酶促水解物；

2、谷氨酸单钾盐：是一种表面活性剂，可降低界面的张力，在冻结和脱水过程中既能降低冰、水界面张力所引起的冻结和脱水变形，又能在复水过程中对活性组分起到润湿剂作用。

3、水解乳蛋白又称水解乳清蛋白，是蛋白酶水解浓缩乳清蛋白或乳白蛋白的产物，含足量的必须氨基酸。

4、蔗糖具有渗透作用，能抑制有害微生物生长，延长产品保藏期，具有很好的水溶性。可提高微生物存活率，形成均一悬液，起到水分缓解作用，可防止活性组分变性。

5、水解明胶可去掉杂质蛋白、无抗原性、无过敏反应、无热源，并且分子量小、均质、易溶于水，可过滤除菌，共熔点为-12℃，对微生物有保护作用，可促进其升华形成冻干骨架阻断热传导和热辐射，能防止有效物质随水蒸气一起升华飞散并使之成形。对微生物的保护作用高出普通明胶10％以上。

上述的组分可以选购自市场上出售的产品，例如，NZ-胺购自SIGMA公司，谷氨酸单钾盐购自SIGMA，水解乳蛋白购自GIBCO，蔗糖购自德国默克，明胶购自SIGMA。

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

冻干冻干保护剂的配方及配制方法：分A液和B液两部分。

1）A液配制： 取NZ胺3g、谷氨酸单钾盐0.375g、蔗糖25g、水解乳蛋白1.875g，将以上成分按顺序溶于100ml注射用水中，充分溶解后摇匀，用0.22μm滤膜过滤除菌，2～8℃保存备用。

2）B液配制：取水水解明胶20g，用70～80℃的注射用水100ml充分溶解后，121℃、15磅高压灭菌30分钟，灭菌后保存在37℃。