[发明专利]一种貉精液常温保存稀释液和采精方法

说明书

技术领域

本发明涉及繁殖生物技术领域，特别是涉及一种貉精液常温保存稀释液和采精方法。

背景技术

貉是珍贵的毛皮动物，以饲养成本低、耐粗饲、抗病力强的特点成为我国三大毛皮动物之一，其养殖数量逐年增加，目前我国年产貉皮量居世界第一。貉虽然在我国养殖量很大，但其繁殖目前还采用本交方式，本交需要大量的种公貉增加饲养成本，浪费人力物力，而且公貉发情早于母貉，在配种后期经常出现大量种公貉无法使用情况，貉人工授精技术可解决这些问题。

貉由于驯养时间短、饲养规模小和物种特异性差异等因素的限制，国内外貉精液采集及相关方面的研究资料很少。目前狐、犬等动物人工授精已较成熟，关于貉人工授精由于采精问题影响研究和推广。目前貉精液保存的研究主要集中在采精方法上，关于貉精液常温保存专用稀释液的研究很少，尚未在中国知网上检索发现。

发明内容

为了提高良种公貉的利用率，降低饲养管理成本。加速貉群改良速度，提高了貉养殖经济效益，本发明的目的是为貉人工授精提供一种貉精液常温保存稀释液和采精方法。在对前人研究和借鉴其他动物的精液常温稀释液配方和采精方法的基础上，根据貉子精子特性和生物学特点，以保存的精子活率、生存指数、顶体完整率、畸形率等重要客观指标为依据，研制出一种貉精液常温保存稀释液配方和一种貉采精方法。

该稀释液的配方为：葡萄糖36-38g、碳酸氢钠1.20-1.30g、乙二胺四乙酸1.20-1.30g、柠檬酸钠5.50-6.30g、氯化钾0.65-0.85g、牛血清白蛋白0.50-3.05g、N-乙酰-L-半胱氨酸0.05-0.30g、青霉素0.50-1.20g、链霉素0.30-1.00g、林可霉素0.05-1.50g、壮观霉素0.01-0.05g，三蒸水定容至1000ml。稀释液采用0.22μm滤器过滤，精液稀释后常温保存温度为17℃。

采精方法的关键为利用发情母貉为台畜训练公貉使之对人工采精形成条件反射，重复3-4次待其形成条件反射后利用放置有发情母貉尿液的模拟母貉台架代替发情母貉即可顺利采得公貉精液。

与现有技术相比，利用本发明可顺利采得公貉精液并稀释后进行保存和人工授精并顺利获得后代，实用的采精技术和效果良好的精液稀释液，必将在很大程度上促进貉人工授精技术的推广，提高养貉业经济效益。

具体实施方式

1.稀释液的配制：取葡萄糖37.538g、碳酸氢钠1.255g、乙二胺四乙酸1.262g、柠檬酸钠6.035g、氯化钾0.758g、牛血清白蛋白1.052g、N-乙酰-L-半胱氨酸0.169g、青霉素0.625g、链霉素0.505g、林可霉素0.150g、壮观霉素0.305g溶于三蒸水中，定容至1000ml容量瓶中，用0.22μm滤器过滤后及时使用或分装于无菌瓶中-20℃冻存。

2.精液采集：将发情母貉固定于采精架上，将其脖子置于卡环中并锁死。让采精公貉爬跨母貉，助手保定公貉。用温肥皂水清洗公貉外阴部后温水冲净，然后用38-50℃0.1％-0.2％新洁尔灭浸泡消毒毛巾浸湿公貉下腹部毛，以不往下滴水为准。采精时先按摩公貉睾丸和会阴部15-60s，刺激性欲给公貉一个采精信号。采精者将拇指、食指捏在公貉阴茎两侧，中指捏在阴茎腹面，握笔状捏住阴茎中部并沿阴茎纵向撸压和滑动阴茎包皮，对阴茎进行摩擦刺激。开始时滑动速度4-6次/s，撸动幅度5-7厘米。待阴茎勃起和球状海绵体膨大后，将包皮撸至球状海绵体后方继续撸压球状海绵体和后部的阴茎，撸压速度减慢，每秒撸压1次，撸压球状海绵体时；稍用力些，如此反复撸压按摩直至公貉射精为止，另一手握住集精杯迅速收集精液。或待海绵体膨大后用另一手拇指和食指轻轻刺激龟头，用无名指和掌心握住集精杯收集精液。采精时尽量不要将阴茎从公貉两后腿之间拉向后方，应拉向侧前方。隔一天采精一次，重复3-4次形成条件反射后可不用发情母貉，采用放置有发情母貉尿液的模拟母貉台架让采精公貉爬跨模拟台架后即可顺利采出精液，利用本方法配合模拟母貉台架采精成功率可达80％以上。

3.将集精杯放入35℃水浴锅中，用移液器吸取20μl精液检查精子活力和密度，取活力0.8以上精液与提前预热好的本精液稀释液等温稀释，将稀释液缓慢注入精液中，边加入边摇匀。稀释好的精液可即时用于输精，也可缓慢降温至室温后17℃保存24-48h后输精。