[发明专利]一种鸡腿菇液体菌种制备及优质高产的创新方法

说明书

技术领域

一种鸡腿菇液体菌种制备及优质高产的创新方法。 

背景技术

在我国是食用菌生产大国，年产鲜菇650万吨，占世界总产量的65-70%，食用菌产业已成为我国农业出口创汇的一项主要来源。鸡腿菇作为我国主要生产品种之一（目前国内产量最大的分别为双、香、平、鸡），年产量60万吨。它不仅为农村的可持续发展、调整农业产业结构起着积极的作用，而且充分利用了大量的农作物秸秆和下脚料等废物，用这些原料生产鸡腿菇使菇业不但获得了好的经济效益，而且对于保护环境、发展生态农业都有不可低估的作用。但是我国目前的生产技术总体水平还很落后，多数还处在小规模家庭作坊式的低水平、低产量的状态。随着我国加入世界贸易组织与国际经济的接轨，这种产量低、质量差、规模小的生产模式远远不能适应激烈的市场竞争，无法同国际的同行业竞争（资源丰富和劳动力低廉的优势越来越弱）。面对入世给食用菌产业带来的机遇和挑战与技术落后现状，我们必须在技术上有所突破和创新。我们以“发展菌业，科技报国”为主导，首先，在鸡腿菇的生产上用液体菌种直接接在栽培袋上养菌出菇，改变了传统的用固体菌种生产的方法。这样解决了生产周期长、污染机会多、转代次数多，菌种易退化变异等问题。另外，我们根据鸡腿菇自身的特性实施了二次覆土和浇大水等技术手段，使得产量、质量大为提高。我们经过几年的研究、反复实验终于研究成功了液体规模化生产新技术，该技术不仅可以大大缩短食用菌菌种的制种和栽培时间，提高菌种质量，降低菌种生产成本，提高子实体品质、产品质量和商品价值等等，而且投资少，技术易掌握，适合我国国情，具有很高的推广价值。 

发明内容

（一）鸡腿菇液体菌种培养基筛选的研究 

1、材料

1.1菌株: 鸡腿菇Cc100，烟台师范学院食用真菌研究所提供

1.2培养基

1.2.1斜面培养基：PDA

1.2.2液体培养基：土豆（去皮）20%、葡萄糖1% 、蛋白胨0.25%、MgSO₄0.1%、KH₂PO₄0.2%，VB₁10mg/L。

1.3培养设备: 旋转式摇床、电子分析天平、精密PH计 

2、方法：

2.1工艺路线：鸡腿菇保藏菌种→斜面扩大培养→液体菌种制备→液体培养

2.2液体菌种的制备：将斜面菌种接种于250ml（装液量为70ml）锥形瓶中,放入25℃恒温箱中静置24小时，然后在 25℃、180r/min 旋转式摇床振荡培养4d,制作液体菌种备用。

2.3摇瓶培养工艺：在250ml锥形瓶中装入70ml受试培养基，将制备好的液体菌种按照10%的接种量进行接种，每项设8个重复，在25℃、180r/min 旋转式摇床振荡培养4d，pH自然，观察记录菌球生长情况，测定菌丝干重、菌球密度和菌球直径，对菌丝体干重进行方差分析。 

2.4菌丝体干重测量：发酵终止后，将摇瓶中的培养液用干燥的脱脂棉过滤，再用蒸馏水多次冲洗后，放于60℃干燥箱内烘干至恒重，测定干重。 

2.5菌球密度的测量：将菌液置于100ml量筒中静置5min，测菌球占菌液体积的百分比。 

2.6菌球直径的测量：,随机取10个菌球排成一条直线,测出其总长度再除以10，即得菌球的平均直径。 

3、结果与分析 

3.1最适碳源的筛选

分别用2%的葡萄糖、红糖、麦芽糖、乳糖、果糖、蔗糖作为液体培养基中碳源，观察菌丝体生长状态，各种碳源对液体培养鸡腿菇菌丝体生长的影响见表1：

表1  不同碳源对鸡腿菇菌丝体生长的影响

    方差分析表明，各组间的菌丝体平均差异有显著性意义（p＜0.05）。所试各种碳源对鸡腿菇菌丝体生长影响的差异较为明显，在本试验条件下，葡萄糖、红糖和蔗糖作为碳源时菌丝体产量最高，麦芽糖作为碳源时产量最低。通过对菌丝体培养形状的观察发现，葡萄糖和红糖菌球数量较多，葡萄糖和蔗糖菌球表面的毛刺状分支较多，活力较好，综合以上各种因素，选用葡萄糖、红糖和蔗糖作为鸡腿菇液体培养基的氮源较为理想。

3.2最适氮源的筛选