[发明专利]一种基于外场调制的SPR检测系统的检测方法

权利要求书

1.一种基于外场调制的SPR检测系统的检测方法,包括下列步骤：

1)将外场设置为0，在可调谐SPR生物芯片上的样品池中分别通入折射率或浓度已知的第一、第二样品溶液，分别完成角度扫描，得到第一样品溶液和第二样品溶液的SPR角度扫描曲线；计算出0外场下的所述SPR检测系统的灵敏度，并根据第一、第二样品溶液SPR角度扫描曲线的线性范围标定检测的动态范围；

2)选定所述动态范围内的某一角度作为入射角度，进行外场扫描，得到反射光强随外场强度变化扫描曲线，进而计算得到反射光强随外场强度变化的线性系数；

3)在所述SPR检测系统的可调谐SPR生物芯片上的样品池中通入待测溶液，选定与步骤2)相同的入射角度，当反射光强超出或即将超出所述动态范围时，保持同一入射角度，调节所施加的外场强度，使所检测到的反射光强度保持在所述动态范围内，读出此时的外场强度和反射光强度；

4)基于步骤2)所得出的线性系数将当前外场强度下的反射光强度转换为0外场下的等效反射光强度，再基于步骤1)所得到的0外场下的所述SPR检测系统的灵敏度，利用该0外场下的等效反射光强度计算出待测溶液的折射率或浓度。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于，所述步骤1)中，在不同强度的外场下分别进行角度扫描，得到第一样品溶液和第二样品溶液的SPR角度扫描曲线，根据第一、第二样品溶液SPR角度扫描曲线的线性范围标定对应于每个强度的外场所对应的动态范围；

所述步骤3)中，当待测溶液的反射光强超过0外场下的动态范围时，通过调节外场强度，使得检测信号反射光强度回到相应外场强度下的动态范围中，然后再读出外场强度和反射光强度。

3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于，所述线性区域是使线性度大于0.9995的反射光强度区域。

4.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于，所述步骤1)中，基于每个外场强度下的SPR角度扫描曲线的线性区域，以线性区域的最大反射光强度和最小反射光强度作为1和0，对SPR角度扫描曲线做归一化处理；并且，用第一样品溶液和第二样品溶液的归一化后的SPR角度扫描曲线，计算出0外场下的所述SPR检测系统的归一化灵敏度；

所述步骤2)中，以线性区域的最大反射光强度和最小反射光强度作为1和0，对外场扫描得到的反射光强随外场强度变化的曲线做归一化处理；

所述步骤3)中，根据所读出的外场强度，依照步骤1)所得出的相应外场强度的归一化SPR角度扫描曲线，对所读出的反射光强度进行归一化处理；

所述步骤4)中，基于步骤2)所得出的归一化后的反射光强随外场强度变化的曲线的线性系数，将当前外场强度下的归一化后的反射光强度转换为0外场下的归一化等效反射光强度，再基于步骤1)所得到的0外场下的所述SPR检测系统的归一化灵敏度，利用该归一化等效反射光强度计算出待测溶液的折射率或浓度。

5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于，所述第一、第二样品溶液是1×PBS、2×PBS、去离子水、磷酸缓冲液或者甘油溶液。

6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于，所述外场为电场、热场、磁场或者声场，所述外场强度为电压、温度、磁场强度或者声强。