[发明专利]新型三聚氰胺抗原和抗体及应用有效
申请号: | 201310048863.1 | 申请日: | 2013-02-06 |
公开(公告)号: | CN103145633A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 王硕;刘冰;史小文 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C07D251/18 | 分类号: | C07D251/18;C07K14/77;C07K16/44;G01N33/543 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 王来佳 |
地址: | 300457 天津市滨*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 三聚 抗原 抗体 应用 | ||
1.一种三聚氰胺半抗原前体,其特征在于:结构式如下:
2.一种三聚氰胺半抗原,其特征在于:结构式如下:
3.如权利要求2所述的三聚氰胺半抗原在制备三聚氰胺抗原中的应用。
4.一种三聚氰胺人工抗原,其特征在于:结构式如下:
所述OVA为卵清白蛋白。
5.一种如权利要求4所述的三聚氰胺人工抗原经动物免疫后获得的三聚氰胺抗体。
6.权利要求5所述的三聚氰胺抗体在检测三聚氰胺方法中或检测三聚氰胺试剂中的应用。
7.一种三聚氰胺的酶标抗原,其特征在于:结构式如下:
所述HRP为辣根过氧化物酶。
8.权利要求7所述的三聚氰胺的酶标抗原在检测三聚氰胺方法或检测三聚氰胺试剂中的应用。
9.一种三聚氰胺的免疫检测方法,其特征在于:方法如下:
包被:将权利要求5所述的抗体溶于50mmol、pH9-10的碳酸盐缓冲液中,
配制成10μg/mL的包被液,酶标板每孔加100μl包被液4℃孵育12-16小时,将包被好酶标板的每个孔,用磷酸盐缓冲液加0.05%v/v Tween20洗液PBST洗涤三次;
封闭:每孔加入200μl、0.5%脱脂乳粉/PBS封闭液,封闭1h;
加样:将待测样品溶于磷酸盐缓冲液PBS中,加样时每孔加入50μl标样;
竞争反应:将权利要求7所述的酶标抗原溶于PBS缓冲液中,加入待测样品或标样后,每孔加入50μl酶标抗原溶液,孵育1h后用PBST洗涤三次;
显色:显色底物使用四甲基联苯胺,将5mg四甲基联苯胺溶于1ml PBS缓冲液中,配制成浓度为0.1%的底物溶液,显色时每孔加入150μl的底物溶液和5μl双氧水,显色15分钟后每孔加入50μl5mol/L的硫酸终止;反应液在酶标仪上读数。
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