[发明专利]香花槐高效组织培养和工厂化繁育的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养及扩大繁殖技术领域，具体涉及一种香花槐的组织培养方法及工厂化扩大繁殖的方法。

背景技术

香花槐（Robinia pseudoacacia cv.idaho）又名富贵树，属蝶形花科落叶乔木，原产于西班牙。香花槐树皮褐色，光滑。株高10-12米，叶互生，光滑，鲜绿色。总状花序腋生，作下垂状，长8-12厘米，花红色，芳香，在北方每年5月和7月开两次花，在南方每年开3-4次花。花期在五月份是30天左右、七月份20天左右、八月份15天左右、九月份10天左右，具有花朵大、花形美、花量多、花期长等特点。花不育，无荚果，不结种子。香花槐性耐寒，能抗零下25度至零下28度低温。耐干旱、耐瘠薄、耐盐碱，对土壤要求不严，酸性土，中性土及轻盐碱土均能生长。根系十分发达，萌芽性强，生长快。香花槐叶体厚，具有较强的抗污染能力，对城市不良环境有耐性。香花槐为稀有的香花树种，集绿化、香化、美化于一身。她的花色艳丽，芳香浓郁，且花量多，花期长，一年开两次花；树形苍劲，姿态优美，可以广泛用于园林及行道绿化，香花槐对铅蒸汽的吸收和粉尘吸附能力强，对环境保护与空气净化的功能显著，香花槐被誉为21世纪黄金树，为园林绿化首推速生观赏树种。利用香花槐抗旱、耐寒、速生、根系发达特点，可与其它树种配合在风沙、干旱地区大面积造林，对防风固沙，改善生态环境具有突出的作用。由于香花槐不结荚果，无种子可供繁殖，现有技术是靠埋根繁殖、枝条扦插、嫁接繁殖和组培繁殖等无性繁殖方法繁育。上述四种无性繁殖方法，无论从繁殖速度还是繁育成本最低的方法是组织培养法。

有关香花槐的组织培养研究的报道较多，研究的重点是对诱导培养基、增值培养基和生根培养基的改进，以提高繁殖系数和生根率。由于香花槐具有广泛的应用价值和美好的发展前景，进一步开展对香花槐组织培养的研究，提高其繁殖系数及成活率有着重要的意义。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种规模化的香花槐高效组织培养和工厂化繁育的方法，应用该方法可使香花槐的继代繁殖达到15倍以上，使组培苗从组培室到温室的移栽成活率达到95%以上。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的。

一种香花槐高效组织培养和工厂化繁育的方法，包括以下步骤：

（1）诱导培养

1）按MS + 6-BA 0.6-0.8 mg/L + KT 0.02-0.05 mg/L + IAA 0.05-0.1 mg/L培养基配方配制成诱导培养基母液；

2）取MS培养基配方质量0.65%-0.75%的琼脂、0.09%-0.10%的椰子汁与培养基母液混合均匀，将培养基调配为PH6，在培养瓶中装入20±3 ml培养基，制成固体诱导培养基；

3）取香花槐当年生枝条，消毒后取0.5 mm 大小的茎尖部分，接种到诱导培养基上，每培养瓶接种1个茎尖；

4）将接种好的培养瓶放到光照强度1500Lx、23-28℃的条件下，每天光照14h，培养28天，得香花槐愈伤组织块，备用。

（2）愈伤组织培养

  1） 按MS + 6-BA 0.3-0.5 mg/L + KT 0.05-0.08 mg/L + IAA 0.1-0.15 mg/L + NAA 0.08-0.1 mg/L + 硼酸6.8-7.0mg/L培养基配方配制成愈伤组织培养基母液；

 2）取MS培养基配方质量0.65%-0.75%的琼脂、0.09%-0.10%的椰子汁与培养基母液混合均匀，将培养基调配为PH6，在培养瓶中装入20±3 ml培养基，制成固体愈伤组织培养基；

3）将诱导培养得到的香花槐愈伤组织块在无菌环境下切成0.4-0.6 cm 的小块，接种到愈伤组织培养基上，每培养瓶接种6-8 块；

4）将接种好的培养瓶放到光照强度2500Lx、23-28℃的条件下，每天光照14h，培养25天，得香花槐愈伤组织分化苗，备用。

（3）继代培养

1） 按MS + 6-BA 0.2-0.3 mg/L + KT 0.05-0.08 mg/L + IAA 0.05 mg/L + GA₃ 1-1.2 mg/L + 硼酸6.8-7.0mg/L + 蔗糖5 g/L培养基配方配制成继代培养基母液；

 2）取MS培养基配方质量0.65%-0.75%的琼脂、0.09%-0.10%的椰子汁与培养基母液混合均匀，将培养基调为PH6，在培养瓶中装入20±3 ml培养基，制成固体继代培养基；