[发明专利]醛和相应醇的微生物合成

权利要求书

1.一种生产醇的方法，包括：

在发酵培养基中培养多个微生物细胞，其中所述细胞被遗传修饰从而与非遗传修饰的细胞相比具有增加的代谢活性；

其中该增加的代谢活性以增加的丙酮酸或2-酮丁酸到醛的转化为特征；

其中所述多个微生物细胞还被遗传修饰从而具有降低的醇脱氢酶活性；

连续或半连续地将醛在汽相中从发酵培养基中移出；

从汽相中冷凝醛；和

将冷凝的醛还原为相应的醇。

2.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞通过表达重组的丙酮酸脱羧酶而在丙酮酸到乙醛的转化中具有增加的代谢活性。

3.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞通过表达重组的2-酮异戊酸脱羧酶而在2-酮丁酸到丙醛的转化中具有增加的代谢活性。

4.权利要求1的方法，其中该微生物细胞通过表达重组的2-酮异戊酸脱羧酶而在对2-酮戊酸、2-酮己酸、2-酮庚酸、2-酮辛酸、2-酮-3-甲基戊酸、2-酮-4-甲基己酸、2-酮-5-甲基庚酸、2-酮-6-甲基辛酸、2-酮-异戊酸、2-酮-异己酸、2-酮-5-甲基己酸、或2-酮-6-甲基辛酸中一种或多种的脱羧中具有增加的代谢活性。

5.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞通过表达重组的ilvGMCD基因或表达重组的ilvBNCD基因而在2-酮丁酸到2-酮-3-甲基戊酸的分支碳链延伸中具有增加的代谢活性。

6.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞通过表达重组的alsS-ilvCD基因或表达重组的ilvIHCD基因而在丙酮酸到2-酮-异戊酸的分支碳链延伸中具有增加的代谢活性。

7.权利要求4、5或6中任一项的方法，其中所述微生物细胞通过表达重组的leuABCD基因而在直碳链延伸中具有增加的代谢活性。

8.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞中降低的醇脱氢酶活性是与非遗传修饰的细胞相比降低至少70%。

9.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞中降低的醇脱氢酶活性是与非遗传修饰的细胞相比降低至少90%。

10.权利要求1的方法，其中在汽相中移出醛的步骤包括选自下组的步骤：搅动发酵培养基，用惰性气体气提发酵培养基，用含氧气体气提发酵培养基，和将醛与结合剂暂时结合。

11.权利要求1的方法，其中移出醛的步骤是连续实施的。

12.权利要求1的方法，其中所述醛选自下组：乙醛、丙醛、丁醛和2-甲基-1-丙醛。

13.权利要求1的方法，其中将冷凝的醛还原成相应醇的步骤选自下组：电化学还原、酶还原和用氢催化还原。

14.权利要求1的方法，其中所述微生物细胞属于选自下组的属：埃希氏菌属(Escherichia)，芽孢杆菌属(Bacillus)，棒状杆菌属(Corynebacterium)，罗尔氏菌属(Ralstonia)，发酵单胞菌属(Zymomonas)，梭菌属(Clostridium)，乳杆菌属(Lactobacillus)，聚球藻属(Synechococcus)，集胞藻属(Synechocystis)，酵母属(Saccharomyces)，毕赤酵母属(Pichia)，假丝酵母属(Candida)，汉逊酵母属(Hansenula)，和曲霉属(Aspergillus)。

15.权利要求14的方法，其中微生物细胞属于选自下组的种：大肠杆菌(Escherichia coli)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，细长聚球藻(Synechococcus elongatus)，真养罗尔氏菌（Ralstonia eutropha），和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。

16.权利要求1的方法，其中发酵培养基具有选自下组的碳源：葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、纤维素、半纤维素、甘油、二氧化碳、蛋白质和氨基酸。