[发明专利]一株产纳他霉素的新菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域，特别涉及一株产纳他霉素的新菌株及其应用。

背景技术

纳他霉素是一种四烯大环内酯类抗生素，为高效、安全的抗真菌天然产物，由于其对哺乳动物细胞的毒性极低，而对真菌的抑制作用极强，抗菌谱极广，并且能够阻止丝状真菌中黄曲霉毒素的形成，加之其溶解度低，可用其对食品表面进行处理以增加食品的保质期，却不影响食品的风味和口感，因而是一种十分理想的高效、安全的天然食品防腐剂，多年来在30多个国家被广泛用于乳制品、肉类、水果、饮料等许多食品工业中，是国际上被美国FDA正式批准的仅有的两种生物防腐剂之一。我国1996年食品添加剂委员会对纳他霉素进行评价并建议批准使用，1997年3月我国卫生部正式批准其作为食品防腐剂，成为我国已批准使用的3种生物防腐剂之一。纳他霉素通过链霉菌发酵生产，菌株的生产能力是关系到其发酵水平和生产成本的关键因素，因此高产菌种的选育是纳他霉素研究的热点之一。前人报道的纳他霉素产生菌有恰塔努加链霉菌（Streptomyces chattanovgensis）、纳塔尔链霉菌（Streptomyces natalensis）和褐黄孢链霉菌（Streptomyces gilvosporeus）；近年北京市农林科学院植保环保所研究发现了纳他霉素新的产生菌利迪链霉菌（S.lydicus）菌株A01（中国专利，申请号为200710187435.1，授权公告号为CN100590194C）和A02（中国专利，申请号为200610065620.9，授权公告号为CN100467588C），其以纳他霉素为主要有效成分的活性产物对包括多种植物病原真菌在内的供试真菌均有强烈的抑制作用。但因其为野生型菌株，在生产能力和工艺性状等方面尚不能满足工业化生产的要求，因此需要通过菌种选育获得性状优良的高产新菌株。

目前纳他霉素生产菌菌种选育的手段有：诱变育种、原生质体育种和基因组重排育种（genome shuffling）和基因工程育种，这些育种手段各有千秋。诱变育种是实验室常规育种手段，其操作简单、成本低，不需要了解菌株的遗传背景。但诱变育种正突变率低，筛选工作量大，故构建一种快速有效的筛选模式是试验成功的关键。鉴于目前对纳他霉素的遗传背景和生物合成途径尚未完全清楚，基因组重排技术在纳他霉素生产菌的遗传改造中将占据重要地位。

发明内容

本发明的目的是提供一株产纳他霉素的新菌株及其应用。

本发明所提供的产纳他霉素的新菌株具体为利迪链霉菌（Streptomyces lydicus）JZB130117。该菌株是以利迪链霉菌（Streptomyces lydicus）A01CGMCC No.1653与利迪链霉菌（Streptomyces lydicus）A02CGMCC No.1654为出发菌株，对其进行诱变、基因组重排（Genome shuffling）后所得新菌株。该菌株已于2011年12月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所），保藏登记号为CGMCC No.5562。

所述利迪链霉菌（Streptomyces lydicus）JZB130117CGMCC No.5562在制备纳他霉素中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明的再一个目的是提供一种制备纳他霉素的方法。

本发明所提供的制备纳他霉素的方法，具体可包括如下步骤：发酵培养所述利迪链霉菌（Streptomyces lydicus）JZB130117CGMCC No.5562，收集发酵产物，获得纳他霉素。

在上述方法中，所述发酵培养的培养基（发酵培养基）的溶剂为水，溶质及其终浓度如下：玉米淀粉(35.0-40.0)g/L，棉籽精粉(20.0-25.0)g/L，葡萄糖(10.0-15)g/L，豆粕粉(25.0-28.0)g/L，蛋白胨(5.0-8.0)g/L，MgSO₄·7H₂O(1.0-1.2)g/L，KH₂PO₄(0.2-0.3)g/L，NaCl(4.0-6.0)g/L，(NH₄)₂SO₄(5.0-6.0)g/L和CaCO₃(5.0-8.0)g/L，pH7.0~7.4。