[发明专利]丹参药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

说明书

技术领域

本发明涉及中药材指纹图谱的建立方法，尤其是丹参药材高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的建立方法，以及由此方法所得到的丹参药材标准指纹图谱。属于药物分析技术领域。

背景技术

丹参又名赤参，紫丹参，红根等。主要功效为活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。丹参根主含脂溶性的二萜类成分和水溶性的酚酸成分，还含黄酮类，三萜类，甾醇等其他成分。临床主要用于心脑血管疾病的治疗，还广泛地用于治疗慢性肝病、慢性肾功能不全、小儿病毒性心肌炎、脉管炎、硬皮病、流行性出血热、过敏性紫癜、精神分裂症、肺炎、血管性头痛、鼻炎等。由于受产地、气候和生态环境等的影响，不同丹参药材所含的成分也存在着一定差异。《中国药典》对丹参药材的质量控制仅限于丹参酮II A和丹酚酸B含量的测定，不能系统、完整地反映丹参的内在质量。要控制丹参及其成方制剂功效，就不能只针对其中1、2个化学成分，必须对它的物质群整体予以控制。

中药指纹图谱特指中药材或中成药经光谱或色谱等现代分析技术得到的中药各组分群体共有特征的图谱或图象。目前指纹图谱已成为国内外公认的鉴别中药品种和评价中药质量的最有效手段之一。

中药指纹图谱经过了数十年的研究，使用了包括紫外、红外、气相、高效液相、薄层、核磁共振、扫描电子显微镜、计算机图像分析、电泳技术、同功酶分析法、分子生物学技术、聚类分析技术等许多现代分析测试手段，为中药的物质鉴定和成分分析积累了大量的数据。但从中药全面质量控制的角度看，还远未达到有效地反映和控制中药的整体质量的目的。高效液相色谱(HPLC)指纹图谱在国际上容易获得认可，包括美国、英国、法国、加拿大、德国、日本和印度在内的许多国家更愿意接受HPLC指纹图谱。因此，为中药材建立相应的HPLC指纹图谱，是现阶段控制中药内在质量的有效手段。

发明内容

本发明是要解决现有中药的物质鉴定和成分分析中不能有效地反映和控制中药的整体质量的问题，从而提供的丹参药材指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱。

本发明的丹参药材指纹图谱的建立方法按以下步骤进行：

一、供试品溶液的制备：按质量体积比为1g∶100～300mL将丹参药材粉末与水混合均匀，加热回流45～60min，冷却后取上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；

二、高效液相色谱分析：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以质量百分含量为1％冰醋酸水溶液为A相，乙腈为B相进行流动相梯度洗脱，分析供试品溶液，得到丹参药材的指纹图谱；其中，所述高效液相色谱条件为：色谱分离柱填料为YMC-PackC18，规格为150×4.6mm，5μm，柱温为25℃～35℃，流动相为A相和B相，流速0.8～1.2mL/min，供试品溶液进样量为10μl，高效液相色谱仪中检测波长290nm。

利用丹参药材指纹图谱的建立方法得到了丹参药材指纹图谱。

本发明具有如下显著的优点和用途：

(1)将丹参药材作为一个整体对待，通过比较其共有峰可以找出不同药材之间的细微差异；

(2)供试品制作简便，色谱条件容易实现；

(3)方法的稳定性和重现性都比较好；

(4)适于对丹参药材真伪、产地和品质的鉴别和控制。

附图说明

图1为本发明提供的丹参药材的标准指纹图谱，其中1至18为丹参药材共有特征峰。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式的丹参药材指纹图谱的建立方法按以下步骤实现：

一、供试品溶液的制备：按质量体积比为1g∶100～300mL将丹参药材粉末与水混合均匀，加热回流45～60min，冷却后取上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液；

二、高效液相色谱分析：将步骤一得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪，以质量百分含量为1％冰醋酸水溶液为A相，乙腈为B相进行流动相梯度洗脱，分析供试品溶液，得到丹参药材的指纹图谱；其中，所述高效液相色谱条件为：色谱分离柱填料为YMC-PackC18，规格为150×4.6mm，5μm，柱温为25℃～35℃，流动相为A相和B相，流速0.8～1.2mL/min，供试品溶液进样量为10μl，高效液相色谱仪中检测波长290nm。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤一中所述的微孔滤膜过滤是采用0.45μm微孔滤膜进行过滤的。其它步骤及参数与具体实施方式一相同。