[发明专利]一种大鼠亚低温动物模型的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物模型领域，具体地说，是一种快速有效大鼠亚低温动物模型的制备方法。

背景技术

亚低温作为一种神经保护疗法已有一个半多世纪的历史。国际上将低温划分为轻度低温 (mild hypothermia):33～36℃;中度低温 (moderate hypothermia):28～32℃;深度低温 (deep hypothermia): 20～27℃;超深低温 (profound hypothermia): 19℃以下 ；极深度低温（ultra profound hypothermia）：<5℃。前二者被称为亚低温。

应用啮齿类动物研究亚低温疗法的动物实验很多，总结分析该类实验中亚低温实施、维持、温度检测的方法如下：

1）将动物置于4摄氏度低温环境下。单独利用4摄氏度低温环境可以诱导大鼠亚低温，但所需时间长，动物在缓慢降温过程更易产生寒战等副作用，影响降温效果的同时削弱了亚低温的神经保护作用。

2）动物冷水浸浴。动物冷水（29摄氏度）浸浴，实施方便，但不利于持续温度检测及保持手术大鼠干燥。

3）冰袋直接接触降温、喷洒酒精、风扇辅助降温。冰袋直接接触降温虽然可以较快降低动物体温，但容易造成动物皮肤冻伤，且温度不易控制。喷洒酒精、风扇辅助降温温度也较难控制。

4）输注冷的自体动脉血。输注冷的自体动脉血需要特殊设备、有创操作，并发症多、价格昂贵，不利于动物实验开展。

5）麻醉药物协助降温。麻醉药物本身是否对脑梗死大鼠有保护作用上存在争议，因此麻醉药物协助降温对动物实验结果产生干扰，且影响神经行为学评估的进行。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种大鼠亚低温动物模型的制备方法。

本发明的再一的目的是，提供一种大鼠亚低温动物模型。

本发明的另一的目的是，提供一种大鼠亚低温动物模型的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种大鼠亚低温动物模型的制备方法，包括以下步骤：将大鼠放入通风鼠笼，置于4℃低温环境中，冰袋置于鼠笼外辅助降温，目标温度33±0.5℃，持续监测大鼠肛温的变化；当肛温低于最低限32.5℃时将冰袋移走或将大鼠连同鼠笼放回室温，当肛温高于最高限33.5℃时再将鼠笼移到4℃低温环境中，冰袋辅助降温。

所述的制备方法中持续监测血糖，大鼠禁食禁水，灌胃液灌胃维持血糖。

所述的大鼠术前24小时禁食，不禁水，术前12小时给予灌胃3ml×1次；术后6h、12h、18h、24h、30h分别灌胃3ml-4ml×1次。

所述的灌胃液分为A液和B液，所述的A液每1000ml含有葡萄糖222g和10ml 10%浓NaCl，所述的B液为A液用ddH₂O以1：2的比例稀释。

如果大鼠在未来6h内是常温状态下则用2mlA +1mlB；如果大鼠在未来6h内是在低温状态下则用1mlA +2mlB，并根据血糖情况浓度加减。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：一种大鼠亚低温动物模型，所述的动物模型采用以上所述的方法制备得到。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：所述的动物模型在亚低温动物实验中的应用。

本发明优点在于：

1、迅速达到目标温度（33±0.5℃）；

2、体温波动小；

3、大鼠皮肤冻伤减少；

4、血糖控制在正常范围内。

附图说明

图1. 四组大鼠体温检测结果。

具体实施方式

下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1

一、实验方法

35只试验大鼠分为亚低温组与常温组，前者根据亚低温给与时间点不同分为2h亚低温组、6h亚低温组。所有大鼠在给予低温或者常温干预前均行手术（动物试验需要）。

1、亚低温实施

将待实施亚低温的大鼠置于4℃的通风环境中，冰袋辅助降温。自制通风鼠笼可以避免大鼠皮肤与冰袋的直接接触，避免冻伤。在规定时间点2h 或6h 将亚低温组大鼠放入鼠笼，置于4℃低温环境中，冰袋置于鼠笼外辅助降温，目标温度33±0.5℃，持续观测大鼠肛温的变化。当肛温低于设定的最低限32.5℃时可将冰袋移走或将大鼠连同鼠笼放回室温（25-26℃），当肛温高于设定的最高限33.5℃时再将鼠笼移到4℃低温环境中，冰袋辅助降温。所有大鼠均在30min内达到目标温度。

2、体温监测