[发明专利]一种分离高盐环境放线菌的培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及工业微生物技术领域，具体的说，本发明具体涉及一种分离高盐环境放线菌的培养基及其应用的技术领域。

背景技术

现有技术认为，用一般的分离方法从环境样品中获得的微生物纯培养物重复性非常高，也很难再分离到新物种。尤其是放线菌，由于其产生多种具有生物活性的次级代谢产物而受到微生物学家的广泛关注，但是目前用普通的分离方法筛选到的菌株大部分都是已知菌和常见菌，这给当前活性物质的筛选带来了极大的困难。因此，探索有效的微生物分离方法，从不同角度、不同层次建立分离微生物的新方法就成了微生物领域长期的研究任务和难点。目前国内外对放线菌分离方法的研究主要集中在样品的预处理，抑制剂的选择和培养基成分的改变等方面。对土壤样品进行预处理和加入抑制剂的主要目的是增加目的菌的数量，减少或抑制非目的菌的生长。司美茹等研究发现，将土样在120℃处理1h有利于放线菌孢子萌发，增加放线菌的种类和数量；75μg/ml的重铬酸钾和2μg/ml的青霉素配合使用可以使细菌的数量明显减少而不影响放线菌的种类和数量。薛清等研究发现将土样在120 W功率模式下微波辐照3min对提高放线菌的出菌率有促进作用。姜怡等研究发现使用100 mg/L的放线菌酮和100 mg/L制霉菌素能有效抑制真菌而不影响放线菌的生长。Li等使用极高频辐射(extremely high frequency radiation，EHF)与连续照射联合使用的方法分离出了较多种类的稀有放线菌；Nonomura等使用6%的酵母提取物溶液处理样品能分离到新的放线菌物种。Esther使用噬菌体作为指示物定向分离稀有放线菌；Hayakawa等以腐殖酸维生素培养基为基础，加入不同种类的抗生素，再结合不同的样品前处理方法，分离出了小双孢菌(Micromonospora)、野野村氏菌(Nonomuraea)、链孢囊菌(Streptosporangium)、螺旋游动菌(Spirilliplanes)、草孢菌属(Herbidospora) 、马杜拉放线菌(Actinomadura)、指孢囊菌(Dactylosporangium)、小四孢菌(Microtetraspora)、地嗜皮菌(Geodermatophilus)、游鱼孢菌(Sporichthya)等大量稀有放线菌。迄今为止，没有那一种培养基能同时分离所有的微生物。

由于放线菌是一类具有巨大应用价值的微生物，所以开发放线菌资源就显得尤为重要。一直以来，分离方法一直是限制人们开发利用这类微生物资源的“瓶颈”，尤其是高盐环境下放线菌的纯培养技术一直没有突破，特别是针对高盐环境下放线菌，没有报道一种适合多种放线菌的培养基。

发明内容

针对现有技术中未见报道一种适合多种放线菌的培养基的技术现状，本发明目的在于提供一种分离高盐环境放线菌的培养基及其应用，填补了国内外针对高盐、寡营养的特殊环境和高盐环境没有一种培养基适合多种高盐环境放线菌的培养分离问题，为放线菌资源的开发提供菌种支撑具有广泛的应用价值。

本发明采用的主要技术方案：

本发明结合嗜盐放线菌对不同盐离子类型的选择和适应性生理学特点，设计分离培养基，全面挖掘盐湖沉积物放线菌资源，客观认识盐湖沉积环境中放线菌的物种多样性，结合沉积物样品离子类型如阳离子Na⁺、K⁺、Mg²⁺、Ca²⁺等、阴离子Cl^-、CO₃^2-、SO₄^2-、HCO₃的多样性，设计分离培养基，从而获得更多的放线菌资源。