[发明专利]一种微生物固态培养基的粉碎方法及培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及微生物固态培养基的培养技术领域，尤其涉及一种对高湿度培养基进行非剪切式无菌粉碎的粉碎方法以及应用此粉碎方法的培养方法。

背景技术

在微生物固态纯培养过程中，氧气、养分的充足供给、无污染是扩培质量保证的关键。但现有的扩培技术中，为了满足微生物对氧气的需求会采用隔菌式培养或敞开式培养。为了满足微生物对养分的需求会采用小扩培量培养、静置式培养或较大扩培量培养、粉碎式培养。采用隔菌式培养方法能有效避免污染，但由于隔菌容器中的氧气自主渗透效果较差、位于培养基底层的微生物难以利用，因此该方法存在单次扩培量少、培养时间长、产能低等缺陷；采用敞开式或粉碎式培养方法，由于在粉碎的过程中，氧气可充分渗透到培养基底部，因此单次的敞开式扩培量较大，但该法在粉碎过程中明显存在容易引入外源污染的缺陷，而且在粉碎时，还会因使用振动、切割或挤压研磨等产生剪切力的粉碎方法，而破坏微生物的繁殖体，使扩培质量下降。

如专利申请号为200910244881.0、发明名称为“一种食用菌二级种(原种)培养基配方及制作方法”的中国专利申请，其使用敞开式和静置式培养，而该方法下进行的食用菌培养过程中，由于装入培养基与空间氧气接触面积有限，对内部培养基养分的利用较困难，因此培养长达25~30天才获得成曲种。且该专利并未使用隔菌式培养容器，因此存在污染及需在发菌期进行污染后处理。

又如专利申请号为90104141.6、发明名称为“一种酱油制曲新工艺”的中国专利申请，则使用了敞开式和粉碎式培养方法，该方法是通过在扩大培养过程中对固态培养基进行人工碾压或设备剪切的方式来粉碎打散结块的曲料，使接入的微生物孢子与曲料接触面积增大，以利于微生物对培养基的充分利用，因此培养时间只需2-3天即获得成种。但由于该方法中，翻曲的过程无法避免引入外源杂菌污染问题，且在进行人工碾压或设备剪切粉碎曲料时产生的强剪切力对培养基中微生物的菌丝体细胞造成细胞结构断裂粉碎、完整性受到严重破坏，故大大降低了微生物的扩大培养质量。

因此，目前现有的微生物固态培养方法均存在各自的缺陷，都无法同时解决氧气养分的充足供给、培养量少、扩培时间长、易受污染以及过程加入强剪切力粉碎容易导致微生物的菌丝体细胞结构性断裂受到严重损伤破坏等问题。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种微生物固态培养基的粉碎方法，使得物料能在避免引入污染物又不会对菌体细胞造成机械损伤的情况下被分散、粉碎。基于此，本发明还提供一种利用此粉碎方法的培养方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是

一种微生物固态培养基无菌粉碎方法，包括如下步骤：施力于盛放有微生物固态培养基的容器，使容器按预定轨迹作往复运动并使容器内的固态培养基形成与容器运动轨迹相反的往复运动料流。

优选地，所述预定轨迹为弧形轨迹或直线轨迹。

优选地，微生物固态培养基随容器往复运动的频率为0.08HZ~0.11HZ，往复运动的时间为10~300秒。

优选地，微生物固态培养基占容器体积的百分比为50%以下，容器体积为0.1m³以下。

本发明的一种微生物固态培养基的培养方法，包括如下步骤：在培养过程中，间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎，粉碎方式为：施力于盛放有微生物固态培养基的容器，使容器按预定轨迹作往复运动并使容器内的固态培养基形成与容器运动轨迹相反的往复运动料流。

优选地，所述预定轨迹为弧形轨迹或直线轨迹。

优选地，所述间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎为：在培养过程中，出现粒径大于5mm的团块时，对微生物固态培养基进行粉碎。

优选地，所述间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎为：在培养过程中每个微生物固态培养基温度高峰期对微生物固态培养基进行粉碎。

优选地，所述间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎为：在微生物繁殖体生长过程中，温度大于34摄氏度时，对微生物固态培养基进行粉碎。

优选地，所述间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎为：在微生物的调整期（或称延迟期）或对数期内，当温度达到34摄氏度以上时进行粉碎。

优选地，所述间歇性地对微生物固态培养基进行粉碎为：在微生物的对数期内，当温度达到34摄氏度以上且出现直径大于5mm的团块时进行粉碎。