[发明专利]一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物及提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一类中药提取物，特别是涉及用于一类抑制体外糖基化产物生成中药提取物及提取方法和应用。 

背景技术

糖尿病在中医学上属于“消渴证”范畴。糖尿病血管病变是糖尿病的主要并发症，其大血管病变性质为动脉粥样硬化，主要累及主动脉、冠状动脉等大血管，而糖尿病的微血管病变是糖尿病特有的慢性血管并发症，主要表现为视网膜、肾等微血管病变。临床统计表明，40％－50％的糖尿病患者在发病10年后发生视网膜病变；约有2％的患者在发病15年后完全失明；5％~10％的患者在发病20年后恶化成终末期肾病。虽然糖尿病肾病发生发展的确切病理机制目前尚不十分详尽，主要有非酶糖化学说、多元醇通路学说、蛋白激酶C激活学说、氧化应激等。但比较公认的假说是在长期高血糖状态下，葡萄糖分子可与体内蛋白质发生非酶糖基化反应，形成不可逆的强活性物质—晚期糖基化终产物(AGEs)的结果。AGEs的生成是正常体内存在的一种自然化学反应，即氨基酸和还原糖生成稳定的Amadori产物，这一反应由Maillard在1912年首次发现，称为Maillard反应。Maillard反应发生在体外或体内蛋白质等物质的氨基与糖的醛基上，不需酶的催化，但是一个极为复杂的过程。首先蛋白质分子和糖类发生缩合反应，生成不稳定的薛夫碱（Shiff bases），而后薛夫碱可发生分子内的重排而生成较为稳定的阿马多里（Amadori）重排产物。上述两步反应均为可逆性反应，生成的产物称为早期糖基化产物。此后该产物缓慢地经过一系列脱水、氧化及化学重排，产生高度活性的羰基化合物，如3-脱氧葡萄糖酮醛（3-deoxyglucosone,3-DG），进而与蛋白质的自由氨基起反应，凝聚形成不可逆的终末产物，称之为晚期糖基化终产物（AGEs）。中医认为内热是消渴病发生发展的始动因素，进一步可以伤阴导致肾阴虚，最后阴损及阳，而成阴阳俱虚之证。阴虚热盛贯穿糖尿病肾病的始末，尤多见于糖尿病肾病重症患者。而糖尿病肾病的西医病因病机研究发现AGEs是导致糖尿病肾病变的主要病因，AGEs的直接损伤作用以及通过RAGE信号通路引起的肾脏病变是糖尿病肾病发生发展的主要病理基础。故寻找药物直接抑制中医认为的“内热”物质基础——AGEs的生成是控制糖尿病血管病变的有效途径。 

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一类抑制体外糖基化产物生成中药提取物及提取方法和应用。 

技术方案： 

一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物，其特征在于该中药提取物为生地2份和山茱萸1份的分煎水提物、合煎水提物、水提含药血清或水提醇沉有效部位。 

所述的一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物，其特征在于分煎水提物的提取方法，包括以下步骤：各取生地2份、山茱萸1份，每次按4-12倍量加入蒸馏水后，分别提取2-4次，分别浓缩，按生地：山茱萸=2：1混合均匀，得生地山茱萸分煎水提物。 

所述的一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物，其特征在于合煎水提物的提取方法，包括以下步骤：取生地、山茱萸药材以2：1的比例混合均匀，加入8-12倍量蒸馏水后，反复提取2~4次，提取1-2h，合并提取液、浓缩，得生地山茱萸合煎水提物。 

所述的一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物，其特征在于，生地、山茱萸分煎和合煎水提液的含药血清提取方法，首先制备生地山茱萸分煎和合煎水提物；然后，选取SD大鼠，将生地山茱萸分煎和合煎水提物给大鼠灌胃，连续给药5-7天后，禁食，于末次给药1-2小时后取血，3000rpm离心10-20min，分离血清，于56℃水浴中灭活补体20-40min，经0.22μm微孔滤器除菌，-20℃保存备用，即得生地、山茱萸分煎和合煎水提物含药血清。 

所述的一类抑制体外糖基化产物生成的中药提取物，其特征在于生地水提醇沉有效部位的提取方法，包括以下步骤：将生地粉碎，每次4-10倍量水提1-2h，合并提取液，加70%乙醇醇沉，静置过滤得上清液和醇沉物，上清液挥至无醇味，上大孔树脂，用蒸馏水洗脱，得寡糖部位；上清液继续用30%乙醇洗脱，收集醇洗脱液，得环烯醚帖苷部位；醇沉物加蒸馏水溶解，离心后取上清液，并挥至无醇味，得多糖部位。