[发明专利]氯霉素免疫亲和凝胶检测柱无效
| 申请号： | 201210335125.0 | 申请日： | 2012-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN103675256A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 王硕;生威;袁萌;刘津涛;王俊平;张燕 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | G01N33/53 | 分类号： | G01N33/53 |
| 代理公司： | 天津滨海科纬知识产权代理有限公司 12211 | 代理人： | 孙春玲 |
| 地址： | 300457 天津市滨海新区塘沽经济技术*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 氯霉素 免疫 亲和 凝胶 检测 | ||
1.氯霉素免疫亲和凝胶检测柱的组成，其特征在于：凝胶检测柱是在一个标准的1mL固相萃取柱内设有两层，上层为氯霉素抗体胶与封闭胶混合加入形成的检测层，下层为HRP抗体胶与封闭胶混合加入形成的质控层，质控层和检测层之间隔开一个3mm的空气层。
2.权利要求1所述的氯霉素免疫亲和凝胶检测柱的组成，其特征在于：首先将聚乙烯垫片加入1mL的固相萃取柱中，然后加入150μL的用HRP抗体胶与封闭胶按1∶100混合比例制得的混合胶，加入第二层聚乙烯垫片，用注射器活塞将PBS压出，在组装好的质控层上方约3mm处加入第三层聚乙烯垫片，然后加入150μL的用氯霉素抗体胶与封闭胶按1∶20混合比例制得的混合胶，最后在顶部加入第四层垫片，用注射器活塞将PBS压出。
3.权利要求1所述的氯霉素免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：所述的氯霉素免疫亲和凝胶检测柱检测氯霉素的检测限为1μg/L。
4.权利要求1所述的氯霉素免疫亲和凝胶检测柱，其特征在于：
(1)封闭胶的制备使用溴化氰活化琼脂糖凝胶加入HCl溶液溶胀后被转移到特制的具砂板层析柱中用HCl溶液进行淋洗，再用偶联缓冲液冲洗柱子后加入甘氨酸封闭液室温封闭2h，再用偶联缓冲液和醋酸钠缓冲溶液反复冲洗凝胶，待清洗液抽空，制备好的封闭胶用PBS按体积比1∶3悬起，再加入0.3ml/L的抑菌素，放置于4℃保存待用；
(2)抗体胶的制备方法同封闭胶，差别仅在于在封闭之前0.5mg/mL的氯霉素特异性抗体被加入到凝胶当中室温偶联2h。
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