[发明专利]防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及植物病害防治领域，尤其涉及一种防治植物青枯病和根肿病的生防制剂及其制备方法和应用。

背景技术

作物细菌性青枯病是由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种系统侵染的毁灭性土传病害，俗称“植物瘟病”。青枯劳尔氏菌寄主广泛，可侵染44个科的数百种植物。目前，细菌性青枯病的防治是世界公认的一大难题，它广泛分布于世界各地，在我国南方省市发生严重，尤其在浙江，近年来不但茄科、瓜类受害，大面积发生的桑青枯病更对蚕业生产造成严重损失。

我国从20世纪90年代开始进行青枯病的生物防治制剂研究，何礼远和康耀卫等利用青枯菌无毒菌株和荧光假单胞菌诱导花生产生抗病性(何礼远，康耀卫.利用青枯菌无毒菌株和荧光假单胞菌诱导花生产生抗病性.植物保护学报，1990，17(2)：113-116)，杨合同等利用芽孢杆菌防治生姜青枯病取得了较好的效果(杨合同，庞定远，任欣正.姜瘟病生物防治试验初报.山东科学，1990，3(4)：42-46)。但国内外现有生防制剂均为单一的活菌体，只针对某一生化型。而Hayward根据青枯菌对乳糖、麦芽糖、纤维二糖和甘露醇、甜醇、山梨醇氧化能力的差异，把青枯菌区分为4个生化型，华静月和何礼远认为还存在生化型V(华静月，何礼远.我国植物青枯菌的生化型和其它生理差异.植物保护学报，1984，11(1)：43-50)。青枯菌的生化型多样性给病害防治增加了很大的难度。

十字花科作物是我国最重要的油料和蔬菜作物，种植面积3.75亿亩，其中油菜面积1.02亿亩，十字花科蔬菜2.73亿亩。根肿病是十字花科作物上重要的土传病害，由芸苔根肿菌(Plasmodiophora brassicae)侵染所致，危害面积约6000万亩，平均产量损失达20％～30％，严重田块产量损失达60％以上，甚至绝收，每年导致油菜经济损失约10亿元、蔬菜经济损失约200亿，极大地制约了油料和蔬菜产业的持续稳定发展及农民增收。但对于根肿病的防治，尚缺乏高效、低毒、低残留、低成本的化学药剂；在农业防治方面，研究不够全面系统，存在不少弊端。

苏婷等从不同生态环境的植物根际土壤中筛选获得一株能防治多个青枯病生化型、防效稳定、具有商品竞争力的生防菌(苏婷，路梅，周青，等.抗不同生化型青枯菌的生防菌筛选鉴定及其活性分析.植物保护学报，2010，37(5)：431-435)，探讨进一步提高该菌株对植物青枯病的生防效果，对其规模化生产应用具有重要意义。同时，探讨该生防菌对其它植物病害的防治有利于该菌株的推广应用。

发明内容

本发明提供了一种生防制剂的制备方法，利用解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008在适宜的发酵培养基和发酵培养条件下通过微生物发酵制备生防制剂，工艺简单，菌体生长代谢旺盛，产拮抗物质较多。

一种生防制剂的制备方法，包括：将经活化的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)ZJUB2008接种到培养液中，于25-45℃发酵培养6-120h。

所述的解淀粉芽孢杆菌ZJUB2008已保藏，保藏于位于武汉市珞珈山武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏日期为2009年7月13日，保藏编号为CCTCC NO：M209145。苏婷等公开了该菌株的筛选和鉴定，该菌株为从浙江省杭州市、海南省儋州市、云南省思茅地区镇源县、河南省南阳市卧龙区等不同生态环境的植物根际土壤中分离并筛选得到的，经鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌，对不同生化型的青枯菌均具有一定的防治效果(苏婷，路梅，周青，等.抗不同生化型青枯菌的生防菌筛选鉴定及其活性分析.植物保护学报，2010，37(5)：431-435)。

以体积1L计，所述的培养液含有以下组分：蛋白胨3-15g，牛肉浸膏0-3g，葡萄糖0-5g，酵母粉0-5g，NaCl 0-8g，余量为水；培养液的pH为5.5-9.0。

优选地，以体积1L计，所述的培养液含有以下组分：蛋白胨10-15g，牛肉浸膏1-3g，葡萄糖0-1g，酵母粉0-3g，NaCl 6-8g，余量为水；培养液的pH为7.5-8.0。