[发明专利]一种用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的制备及使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种生物益生菌制剂，具体地说是一种用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的制备及使用方法，属于生物益生菌制剂领域。 

背景技术

食品动物生产中经常用抗生素来治疗和预防传染性疾病或促进生长。这些抗生素许多与人类使用的药物相同或相近，长期食用含有抗生素的“有抗食品”，轻可致人出现过敏性症状，重则可诱发各类毒副作用，并可能诱导人类耐药性增强。耐药性产生主要是生产养殖中抗生素的使用以及动物、动物生产和环境中细菌耐药基因的次生转移。在动物生产中，人畜共患的沙门氏菌、弯曲杆菌、耶尔森氏菌、一些如大肠杆菌菌株(血清型0157：H7)以及共生菌(如肠球菌)，值得人们的特别关注。因为这些细菌是最有可能通过食物链转移到人体。细菌对抗生素的耐药性是生物体在抗菌药物存在下进化选择的反应。寻找一种替代抗生素的益生菌菌剂成为当务之急。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明设计了一种用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的制备及使用方法，该生物益生菌制剂能够替代养殖场中抗生素，而且能够起到很好的抗菌抑菌效果，解决了抗生素滥 用的问题，且成本低。 

本发明的技术方案为： 

一种用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤： 

(1)菌株培养：将解淀粉芽孢杆菌在固体培养基上划线培养进行活化，然后取单菌落接种到液体培养基进行扩大培养；最后以1∶50的体积比例接种到用发酵罐进行发酵培养； 

所述的发酵培养基的配方为：葡萄糖10g、玉米粉13g、大豆粉15g、蒸馏水1000ml，发酵温度25-30℃，摇床转速180rpm，发酵时间36小时； 

所述的固体培养基为LB固体培养基； 

所述的扩大培养的液体培养基为LB液体培养基，温度为30℃，摇床转速为200rpm。 

(2)提取：菌发酵完毕后，取发酵液用离心机4800rpm离心0.5小时，收集上清液，加入盐酸调节pH值至pH＝2，4℃下12000rpm离心0.5小时，去上清液，加入pH＝7的甲醇，混匀、萃取，然后在4℃下离心，取上清液，用过滤膜偏氟乙烯膜过滤得到益生菌制剂。 

一种上述用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的使用方法，包括以下步骤：

将上述生物益生菌制剂与养殖饲料混合，混合重量比例为1∶1000；每天用2次。 

本发明的优点在于：该生物益生菌制剂能够替代养殖场中抗生 素，而且能够起到很好的抗菌抑菌效果，解决了抗生素滥用的问题，且使用成本低。 

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。 

实施例1 

一种用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的制备方法，包括以下步骤： 

(1)菌株培养：将解淀粉芽孢杆菌在固体培养基上划线培养进行活化，然后取单菌落接种到液体培养基进行扩大培养；最后以1∶50的体积比例接种到用发酵罐进行发酵培养； 

所述的发酵培养基的配方为：葡萄糖10g、玉米粉13g、大豆粉15g、蒸馏水1000ml，发酵温度25-30℃，摇床转速180rpm，发酵时间36小时； 

所述的固体培养基为LB固体培养基； 

所述的扩大培养的液体培养基为LB液体培养基，温度为30℃，摇床转速为200rpm。 

(2)提取：菌发酵完毕后，取发酵液用离心机4800rpm离心0.5小时，收集上清液，加入盐酸调节pH值至pH＝2，4℃下12000rpm离心0.5小时，去上清液，加入pH＝7的甲醇，混匀、萃取，然后在4℃下离心，取上清液，用过滤膜偏氟乙烯膜过滤得到益生菌制剂。 

上述用于替代养殖场中抗生素的生物益生菌制剂的使用方法，包 括以下步骤： 

将上述生物益生菌制剂与养殖饲料混合，混合重量比例为1∶1000；每天用2次。 

本发明实施例采用的解淀粉芽孢杆菌为芽孢杆菌，由国家增产菌技术研究及推广中心提供。 

除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为重量百分数。 

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。