[发明专利]一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取总黄酮的方法，属于农药技术领域，具体地讲是涉及一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法。

背景技术

九里香[Murraya paniculata (L.)]属芸香科(Rutaceae) 九里香属植物，别名千里香、满山香、七里香等。该属植物全世界约14种及2变种。其中亚洲热带及亚热带地区约有12种，我国有8种及1变种，主要产自中国云南、贵州、湖南、广东、广西、海南、福建、台湾等地。九里香是我国十大名花之一，也是一种中药材，现代药理研究表明，九里香具有抗生育和终止妊娠、抗菌消炎、降血糖、抗痉挛及局部麻醉等作用。近年农用活性研究表明，九里香粗提物具有较好的杀虫活性（湖北农业科学，2005；农药，2011；西北农业学报，2011）。

到目前为止，国内外学者已从本属植物中分离到10余种黄酮类化合物。分别为3',4', 5, 5',7,8-六甲氧基黄酮，命名为版纳九里香素(bannamurpanisin)。从九里香叶中分离得到5,7,3′,4′-四甲氧基黄酮、5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮和5,6,7,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮、5,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮、5-羟基-6,7,8,3′,4′-五甲氧基黄酮、5,7,8,3′,4′-五甲氧基二氢黄酮、7-羟基-5,3′,4′-三甲氧基黄酮、3′,5-二羟基-7,4′-二甲氧基黄酮。从九里香果实中分得两个新的黄酮类化合物5-羟基-3,7,8,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮，8-羟基-3,5,7,3′,4′,5′-六甲氧基黄酮等。

专利《千里香叶总黄酮及其制备方法及用途，申请号200710147357.2》中，涉及到黄酮的提取方法，该方法使用大孔树脂、Al₂O₃柱、硅胶柱反复层析得到总黄酮。由于该专利提取总黄酮的过程复杂，不适合于工业化生产；且需要消耗大量有机溶剂，对环境有一定影响。加之九里香具有重要的药理和农用活性，为此，选择简便快捷的提取方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种从九里香茎叶中简便提取总黄酮的方法，以及总黄酮显著的杀虫活性，有利开发成植物源农药。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案如下：

一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法，其特征在于采用如下具体工艺步骤：

a.采摘九里香枝叶，自然晾干，粉碎，过40目筛，得九里香粉末；

b.将九里香粉末浸泡在50-95％乙醇中5-7天，乙醇用量为九里香粉末重量的10-20倍，随后进行超声波提取30-60分钟；

c.减压抽滤，得滤液，加入滤液总量2-4％的脱色剂脱色，过滤，滤液减压浓缩至原来的1/10-1/20，温度控制在50-60℃，回收乙醇；

d.向上述浓缩液中加入其重量3-5倍的自来水，在超声波上震荡，温度控制在40-60℃，时间30-60分钟；

e.过滤，除去不溶物，滤液缓慢加入大孔树脂内，大孔树脂用量为九里香粉末重量的1-1.5倍，使用20倍柱体积的自来水洗脱；再用10-20％乙醇洗脱，使用AlCl₃为显色剂，检测洗脱液，直到流出物呈现阳性；改用50-75％乙醇洗脱，使用AlCl₃为显色剂，检测洗脱液，直到流出物呈现阴性；

f.减压浓缩50-75％乙醇的洗脱液，真空干燥得到总黄酮；

g.以芦丁为标准对照，用紫外分光光度法测定总黄酮含量在50％以上。

所述脱色剂选用硅燥土、白炭黑或活性炭。

所述大孔树脂选用D101大孔树脂、D140大孔树脂、AB-8大孔树脂或XAD16大孔树脂。

所述自来水的pH值为5-7。

本发明具体具有以下优点：

1、九里香原料来源方便。九里香在南方作为园林绿化植物，每年经过修枝整叶，将去除大量枝叶，为九里香黄酮提取提供大量原材料。

2、提取方法简单，适合于工业化生产。本案例采用乙醇渗漉提取，大孔树脂梯度洗脱分离黄酮化合物，操作流程简便，使用设备简单，洗脱剂常见，可以进行工业化生产。

3、节能环保。所用溶剂包含乙醇，可以回收利用，大孔树脂经活化后可以反复使用。

具体实施方法

下面结合优选实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明决不限于下述实施例。

实施例1

一种从九里香茎叶中提取总黄酮的方法，其具体工艺步骤如下：

a.采摘九里香枝叶，自然晾干，粉碎，过40目筛，得九里香粉末；